分离度检测的核心检测项目详解
1. 分离度（Resolution, Rs）
- 定义与公式： ��=2×��2−��1�1+�2Rs=2×W1+W2tR2−tR1 其中，��tR 为保留时间，�W 为基线峰宽。
- 检测标准：
- 一般要求 ��≥1.5Rs≥1.5，以确保基线分离；
- 药典（如USP、EP）对特定化合物可能要求更高（如 ��≥2.0Rs≥2.0）。
- 操作要点： 需验证在方法规定的色谱条件下（如流动相比例、柱温）是否达标。
2. 系统适用性测试（SST）
- 理论塔板数（N）： 评估色谱柱效，计算公式 �=16×(���)2N=16×(WtR)2。柱效过低可能导致分离度不足。
- 拖尾因子（T）： 要求 �≤2.0T≤2.0，峰形拖尾可能掩盖小峰或影响积分精度。
- 重复性（RSD%）： 保留时间和峰面积的相对标准偏差需 ≤1.0%（如药典规定）。
3. 选择性（α）
- 定义： �=��2−�0��1−�0α=tR1−t0tR2−t0，反映色谱系统对两组分的区分能力（�0t0 为死时间）。
- 优化方向： 调整流动相组成、pH值或色谱柱类型以提高α值。
4. 保留时间稳定性
- 检测内容： 多次进样中目标峰保留时间的波动范围（通常要求RSD ≤1%）。
- 意义： 保留时间漂移可能暗示系统泄漏、柱温不稳或流动相比例异常。
5. 峰纯度分析
- 方法： 使用二极管阵列检测器（DAD）或多级质谱（MS/MS）验证主峰是否夹杂杂质。
- 应用场景： 药物纯度分析中，确保目标峰无共洗脱杂质。
6. 流动相/载气条件验证
- 检测项目：
- 梯度洗脱程序的重复性；
- 缓冲盐浓度对分离度的影响；
- 流速变化对峰形和分离时间的影响。
- 案例： 在HPLC中，有机相比例±2%的变化需重新评估分离度。
7. 耐用性测试（Robustness）
- 目的： 评估微小参数变动（如柱温±5°C、pH±0.2）对分离度的敏感性。
- 结果判定： 所有变动条件下 ��Rs 均需 ≥1.5，否则方法需重新优化。
行业标准与法规依据
- 药典要求： USP <621>、EP 2.2.46 明确系统适用性测试参数。
- ICH指导原则： Q2(R1) 强调方法验证中需包含分离度及选择性数据。
总结
上一篇：碎米率检测下一篇：毛蕊异黄酮葡萄糖苷检测
材料实验室
热门检测
7
12
7
12
12
7
12
11
9
6
7
6
3
5
3
3
3
4
4
4
推荐检测
联系电话
400-635-0567
扫一扫关注公众号
