β型溶血性链球菌检验检测：核心检测项目详解

一、标本采集与处理

1. 咽拭子（疑似咽炎/猩红热）
2. 脓液/伤口分泌物（皮肤软组织感染）
3. 血液（败血症或全身感染）
4. 脑脊液（罕见，但需排除脑膜炎）。

• 咽拭子需在扁桃体或咽后壁擦拭，避免唾液污染。
• 脓液标本应取自感染深部，避免表皮菌群干扰。
• 血液需无菌采集，推荐同时采集2-3套血培养瓶以提高检出率。

二、实验室检测项目

1. 直接显微镜检查

• 方法：革兰染色镜检。
• 结果判读：观察到革兰阳性球菌，呈链状排列（短链或长链）。
• 意义：快速提示链球菌感染，但无法区分具体种类（需结合其他检测）。

2. 培养与鉴定

• 培养基：5%羊血琼脂平板（β溶血的最佳观察基质）。
• 培养条件：35-37°C，5% CO₂环境，孵育18-24小时。
• 溶血特征：典型β型溶血（完全透明溶血环）。

• 推荐培养基：含抗生素（如萘啶酸+粘菌素）的哥伦比亚血琼脂，可抑制革兰阴性菌和葡萄球菌。

• 关键试验：
  • 过氧化氢酶试验：阴性（链球菌属均为过氧化氢酶阴性，区别于葡萄球菌）。
  • 杆菌肽敏感性：A群链球菌（如化脓链球菌）敏感（抑菌环>10mm）。
  • PYR试验：阳性提示A群或部分B/D群链球菌。
  • CAMP试验：B群链球菌（无乳链球菌）呈阳性。

3. 血清学分型（Lancefield分群）

• 原理：通过特异性抗体与细菌细胞壁多糖抗原反应确定血清群（A、B、C、G等）。
• 方法：乳胶凝集试验（快速分群，15分钟内出结果）。
• 临床意义：
  • A群（GAS）：化脓链球菌，致严重感染（如坏死性筋膜炎）。
  • B群（GBS）：围产期感染、新生儿败血症。

4. 分子生物学检测

• 实时荧光PCR：靶向特异性基因（如A群的spy1258、B群的cfb基因）。
• 多重PCR：同时检测多种病原体及耐药基因（如红霉素耐药基因erm）。
• 优势：快速（2-4小时）、高灵敏度（尤其对血培养阴性标本）。

5. 快速抗原检测

• 方法：免疫层析试纸条（检测咽拭子中的A群链球菌抗原）。
• 特点：门诊立等可取（10分钟），但敏感性较低（需阴性结果时补充培养）。

6. 药敏试验

• 适用情况：罕见耐药或青霉素过敏患者需替代治疗时。
• 常规药物：青霉素、头孢类、克林霉素、红霉素（需检测诱导克林霉素耐药）。
• 备注：GAS通常对青霉素敏感，无需常规药敏；GBS可能需检测红霉素耐药性。

三、检测流程优化建议

1. 疑似咽炎：首选快速抗原检测+咽拭子培养（双重确认）。
2. 严重感染（如败血症）：血培养+分子检测并行，缩短诊断时间。
3. 新生儿GBS筛查：孕妇孕晚期阴道/直肠拭子培养（推荐使用显色培养基）。

四、质量控制要点

• 标本运输：咽拭子需保湿运送（如Amies培养基），2小时内接种。
• 培养基质控：每批次血平板需用标准菌株（如化脓链球菌ATCC 19615）验证溶血性。
• 分子检测防污染：严格分区操作，加入阴性对照。

五、临床意义与治疗提示

• A群链球菌：需青霉素或阿莫西林治疗，疗程10天（防止风湿热等后遗症）。
• B群链球菌：产前筛查阳性者分娩时需静脉青霉素预防新生儿感染。