一、临床医学检测
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- 病毒检测:如SARS-CoV-2(COVID-19)、HIV(艾滋病毒)、HBV(乙肝病毒)、HCV(丙肝病毒)、HPV(人乳头瘤病毒)分型检测。
- 细菌与寄生虫:结核分枝杆菌、淋球菌、疟原虫等。 应用价值:早期确诊感染,指导治疗方案(如抗病毒药物使用)。
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- 地中海贫血、囊性纤维化、脊髓性肌萎缩症(SMA)等单基因遗传病的基因突变检测。 优势:通过检测特定突变位点,辅助产前诊断或新生儿筛查。
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- EGFR(肺癌)、KRAS(结直肠癌)、BRCA1/2(乳腺癌/卵巢癌)等基因突变检测。 意义:指导靶向治疗和预后评估(如EGFR突变阳性患者适用吉非替尼)。
二、公共卫生与食品安全
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- 沙门氏菌、大肠杆菌O157:H7、单核细胞增生李斯特菌等。 应用场景:食品加工环节的污染监控及疫情溯源。
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- 甲型流感病毒分型(如H1N1)、埃博拉病毒、寨卡病毒等快速筛查。 价值:在疫情初期锁定病原体,遏制传播。
三、法医学与个体识别
- DNA指纹鉴定
- STR(短串联重复序列)分析用于个体识别、亲子鉴定及犯罪现场生物样本比对。 特点:即使微量DNA(如毛发、唾液)也可通过PCR扩增后比对。
四、农业与生物技术
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- 检测作物中CaMV 35S启动子、NOS终止子等转基因标记物。 合规性:确保食品标签法规遵守及国际贸易合规。
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- 非洲猪瘟病毒(ASFV)、禽流感病毒(H5N1)、柑橘黄龙病菌等。 作用:预防疫情扩散,保障农业生产安全。
五、检测流程关键点
- 样本类型:血液、咽拭子、组织、食品提取物等,需针对性预处理(如RNA病毒需逆转录为cDNA)。
- 引物设计:针对目标序列特异性区域,避免交叉反应(如SARS-CoV-2的ORF1ab、N基因双靶标设计)。
- 质控措施:设立内参基因(如人β-actin)排除假阴性,阴性/阳性对照确保结果可靠性。
六、局限性及解决方案
- 假阳性风险:气溶胶污染需通过分区操作(试剂准备区、样本处理区、扩增区)防控。
- 假阴性因素:抑制剂存在或病毒变异可能导致漏检,可通过多重PCR或数字PCR提高准确性。
结语
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