-
- PRSV-CP基因：大多数商业化转基因木瓜携带PRSV病毒的外壳蛋白基因，这是特异性靶标。
- 标记基因：如新霉素磷酸转移酶基因（nptII）、潮霉素抗性基因（hpt），用于筛选转化细胞。
-
- 启动子：检测转基因常用启动子，如花椰菜花叶病毒35S启动子（CaMV 35S）或木薯叶脉花叶病毒启动子（CsVMV）。
- 终止子：如胭脂碱合成酶终止子（NOS）。
-
- 定性PCR：通过特异性引物扩增目标基因（如CaMV 35S、NOS、PRSV-CP），结合琼脂糖凝胶电泳或毛细管电泳判定结果。
- 定量实时荧光PCR（qPCR）：适用于定量检测，灵敏度可达0.1%转基因成分。
- 多重PCR：同时检测多个靶标基因，提升效率。
-
- ELISA：通过抗体检测外源蛋白（如CP蛋白），但易受加工过程中蛋白质变性的影响。
- 试纸条快速检测：适用于田间初筛，10分钟内出结果。
-
- 问题：木瓜富含多糖、多酚及RNA酶，易导致DNA提取纯度低。
- 方案：优化CTAB法，添加PVP-40或β-巯基乙醇去除多酚；使用硅胶膜吸附柱纯化DNA。
-
- 问题：高温加工（如果酱、干燥片）导致DNA片段化。
- 方案：设计短片段扩增引物（<100 bp），或采用环介导等温扩增（LAMP）技术。
-
- 问题：部分转基因木瓜可能携带未申报的基因改造事件。
- 方案：结合宏基因组学筛查未知序列，或通过微滴式数字PCR（ddPCR）提高检测通量。
-
- 依据（EC）No 1829/2003法规，转基因木瓜需强制标识，检测限为0.9%（按成分计）。
- 参考标准：ENGL检测方法指南。
-
- 《农业转基因生物安全管理条例》要求进口木瓜提供转基因安全证书，检测依据GB 19495-2004（转基因产品检测标准）。
-
- 未强制标识，但FDA要求上市前完成安全性评估。检测多遵循ISO 21569/21570标准。
- 采样：按GB/T 8855规定抽取木瓜果肉、种子或加工品样本。
- DNA提取：采用改良CTAB法或商业化试剂盒（如DNeasy Plant Pro Kit）。
- PCR预实验：扩增内源基因（如木瓜CHY基因）验证DNA质量。
- 靶标检测：
- 第一轮：筛查CaMV 35S、NOS等通用元件。
- 第二轮：检测PRSV-CP、nptII等特异性基因。
- 第三轮（必要时）：品系特异性检测。
- 结果判定：通过阳性对照和阴性对照确认扩增有效性。
-
- 保障消费者知情权与选择权；
- 防止未批准的转基因品系流入市场；
- 满足跨境贸易中的合规性要求。
-
- CRISPR等新技术的检测挑战：基因编辑木瓜可能不含外源基因，需开发基于全基因组或脱靶效应的检测方法。
- 便携化设备：基于智能手机的qPCR仪或微流控芯片技术，实现现场快速检测。
转成精致网页
上一篇：转基因植物品系特异性检测下一篇：无公害农产品 芸苔属类蔬菜检测
材料实验室
热门检测
1
4
13
6
12
10
11
15
18
18
20
17
16
18
13
15
17
17
16
18
推荐检测
联系电话
400-635-0567
扫一扫关注公众号
