二十碳五烯酸（EPA）检测：核心检测项目与方法解析

摘要

引言

核心检测项目与意义

1. • 目的：确定样品中EPA占总脂肪酸的百分比（纯度）或绝对含量（mg/g）。
   • 方法：
     • GC-FID：脂肪酸甲酯化后分析，适用纯度检测（如鱼油胶囊≥90%）。
     • HPLC-UV/LC-MS：直接测定游离EPA，避免衍生化误差，灵敏度达0.1μg/mL。
   • 标准参考：ISO 12966-2（GC法），USP〈401〉（脂肪酸甲酯分析）。
2. • 关键指标：
     • 过氧化值（PV）：评估初期氧化，限值≤5 meq/kg（AOAC 965.33）。
     • 茴香胺值（AV）：检测次级氧化产物，PV+AV≤20为合格。
     • 酸价（AV）：反映游离脂肪酸含量，需≤3 mg KOH/g（GB 5009.229）。
   • 加速试验：60℃保存14天模拟长期氧化，评估货架期。
3. • 应用：确认EPA在总脂肪酸中的比例（如鱼油中EPA+DHA≥30%）。
   • 技术：GC-MS联用可同时定量EPA、DHA等，区分顺式/反式异构体。
4. • 重金属：铅（≤0.1 ppm，ICP-MS法）、汞（冷原子吸收法）、砷（氢化物发生-原子荧光法）。
   • 有机溶剂残留：GC-ECD检测己烷、乙醇等（符合ICH Q3C限值）。
   • 微生物污染：需满足《中国药典》无菌要求（需氧菌≤10³ CFU/g）。
5. • 体外抗炎实验：通过LPS诱导巨噬细胞模型，检测EPA对TNF-α、IL-6的抑制率。
   • 体内降血脂模型：高脂饲料喂养大鼠，评估血清甘油三酯下降幅度。

检测方法技术解析

• 方法	灵敏度	前处理	适用场景
  GC-FID	高	需甲酯化	纯度、脂肪酸组成分析
  HPLC-MS	超高	直接进样	复杂基质中痕量EPA检测

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应用领域与案例

• 医药领域：心血管患者血浆EPA水平监测（目标：EPA+DPA+DHA占红细胞膜脂肪酸≥4%）。
• 保健品质量控制：批次检测需符合《GB 26400-2011 ω-3脂肪酸原料要求》。
• 食品工业：婴幼儿配方奶粉添加藻油EPA，需验证EPA含量（≥10 mg/100g）及无溶剂残留。

注意事项

1. 样品保存：-80℃避光储存，添加抗氧化剂（BHT）防止降解。
2. 方法验证：需进行回收率（85-115%）、精密度（RSD<5%）及线性（R²>0.995）验证。
3. 基质效应：血液样品需SPE净化，鱼油需皂化提取以减少干扰。