黄曲霉毒素B族检测技术综述

一、检测项目的核心内容

1. • AFB1：毒性最强，主要检测对象。
   • AFB2：毒性次之，常与AFB1共存。
   • 总B族毒素：AFB1与AFB2的总量（需进行衍生化处理以提高检测灵敏度）。
2. • 安全评估：评估食品、饲料中黄曲霉毒素是否超出国家标准或国际限量。
   • 污染溯源：追踪污染来源，指导农业生产和储存管理。
   • 法规合规：满足进出口贸易中的检测要求（如欧盟、美国FDA标准）。
3. • 中国标准（GB 2761-2017）：
     • 玉米、花生及其制品：AFB1≤20 μg/kg；总B族（AFB1+AFB2）≤20 μg/kg。
     • 婴幼儿配方食品：AFB1≤0.5 μg/kg。
   • 欧盟标准（EC 1881/2006）：
     • 直接食用的花生：AFB1≤8 μg/kg，总B族≤15 μg/kg。

二、检测方法及技术选择

1. • 免疫层析试纸法（胶体金法）：
     • 原理：抗原-抗体特异性结合，肉眼观察显色结果。
     • 特点：快速（10-15分钟）、便携，适用于现场初筛。
     • 缺点：半定量，假阳性率高，需实验室确证。
   • 酶联免疫法（ELISA）：
     • 原理：酶标记抗体与毒素结合，通过吸光度定量。
     • 灵敏度：可达0.1 μg/kg。
     • 适用范围：大批量样品的快速定量分析。
2. • 高效液相色谱法（HPLC）：
     • 搭配荧光检测器（FLD）：需柱前/柱后衍生化（如碘、溴衍生）增强信号。
     • 检测限：AFB1可达0.01 μg/kg。
   • 液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）：
     • 原理：多反应监测（MRM）模式，高特异性、高灵敏度。
     • 优势：可同时检测多种毒素，无需衍生化。
     • 检测限：可达0.001 μg/kg（超痕量分析）。

三、样品前处理关键步骤

1. • 代表性采样：根据GB 5009.22标准，对不均匀样品（如花生）进行多点取样。
   • 避光保存：黄曲霉毒素遇光易降解，需低温（4℃）避光储存。
2. • 提取溶剂：甲醇-水（70:30）、乙腈-水（84:16）等。
   • 净化技术：
     • 免疫亲和柱（IAC）：特异性吸附黄曲霉毒素，去除杂质。
     • 多功能净化柱（MycoSep®）：基于分子筛和吸附剂去除干扰物。

四、检测中的质量控制

1. • 每批次样品需设置空白对照，排除基质干扰。
   • 加标回收率应控制在70%-120%（依据GB 5009.22要求）。
2. • 使用有证标准物质（如Sigma-Aldrich）。
   • 校准曲线线性范围需覆盖预期浓度（R²≥0.99）。

五、检测挑战与解决方案

1. • 复杂样品（如香辛料、中药）需优化提取方案，结合QuEChERS法净化。
2. • 采用LC-MS/MS结合同位素内标法（如¹³C标记AFB1）提高准确性。
3. • 初筛阳性样品需通过仪器法确证，避免误判。

六、应用领域

1. 食品行业：粮食加工、食用油、乳制品等。
2. 饲料安全：防止毒素通过动物产品进入食物链。
3. 中药材监控：易霉变药材（如枸杞、薏苡仁）的质控。