一、检测原理
二、样本类型与采集
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- 痰液：首选晨痰（深咳后采集），连续3天以提高检出率。
- 体液：胸腹水、脑脊液、关节液等（需离心浓缩）。
- 组织活检：淋巴结、肺组织等（需研磨处理）。
- 尿液或粪便：用于疑似泌尿系统或肠道结核患者。
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- 避免唾液或食物残渣污染痰样本。
- 无菌操作采集体液样本，防止杂菌干扰。
三、检测流程
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- 液化与消化：使用4% NaOH或N-乙酰-L-半胱氨酸（NALC）处理痰液，溶解粘蛋白并杀灭杂菌。
- 离心浓缩：提高抗酸杆菌的检出率。
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- 齐-尼染色法：
- 初染：石碳酸复红加热染色5分钟。
- 脱色：3%盐酸乙醇脱色至无红色流出。
- 复染：亚甲蓝复染30秒，背景呈蓝色。
- 荧光染色法：金胺O染色后荧光显微镜观察，灵敏度更高。
- 齐-尼染色法：
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- 油镜观察（齐-尼法）：至少观察100个视野，阳性标准为至少2条抗酸杆菌/300视野。
- 荧光显微镜：筛查效率高，但需复核齐-尼染色确认。
四、结果判读与报告
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- 阴性：未发现抗酸杆菌。
- 阳性分级：
- 1+：1-9条/100视野。
- 2+：10-99条/100视野。
- 3+：≥100条/视野（单个视野可见多条）。
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- 阳性结果需结合临床表现，可能存在非结核分枝杆菌（NTM）感染。
- 阴性结果不能完全排除结核病（需结合培养或分子检测）。
五、临床意义
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- 快速筛查：1-2小时内出结果，适用于结核病高负担地区。
- 传染性评估：痰涂片阳性提示开放性结核，传染性强。
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- 灵敏度低：需≥10^4条菌/mL样本方可检出，漏检率高。
- 无法区分菌种：需结合培养、分子检测（如GeneXpert MTB/RIF）确认是否为结核分枝杆菌。
六、质量控制
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- 每批次染色需设阳性对照（已知抗酸杆菌涂片）和阴性对照。
- 脱色时间严格控制，避免假阴性（脱色过度）或假阳性（脱色不足）。
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- 显微镜操作需标准化，避免视野遗漏或误判。
七、应用场景
- 结核病防控：基层医疗机构初筛、流行病学监测。
- 疗效监测：抗结核治疗过程中菌量变化的动态观察。
- 肺外结核辅助诊断：如结核性脑膜炎（脑脊液镜检）、骨结核（脓液镜检）。
八、总结
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