染色体组型检测：核心检测项目与临床应用

一、染色体组型检测的核心技术项目

1. 常规染色体核型分析（G显带技术）

• 原理：通过细胞培养、秋水仙素阻滞分裂中期细胞，经胰酶消化和吉姆萨染色（G显带），在显微镜下观察染色体的条带模式。
• 检测内容：
  • 数目异常：如唐氏综合征（21三体）、爱德华氏综合征（18三体）。
  • 结构异常：易位（如罗伯逊易位）、倒位、缺失（如猫叫综合征的5号染色体短臂缺失）。
• 分辨率：约5-10 Mb，无法检测微小变异。
• 适用场景：流产组织分析、先天性畸形筛查、原发性闭经/无精症诊断。

2. 荧光原位杂交（FISH）

• 原理：使用荧光标记的DNA探针与靶序列特异性结合，通过荧光显微镜观察特定染色体区域。
• 检测内容：
  • 微缺失/微重复：如22q11.2缺失综合征（DiGeorge综合征）。
  • 融合基因：如慢性粒细胞白血病的BCR-ABL融合基因。
  • 非整倍体快速检测：产前羊水或绒毛样本的13/18/21/X/Y五体筛查。
• 优势：快速（24-48小时）、针对性强，适用于已知靶点的检测。

3. 染色体微阵列分析（CMA）

• 原理：基于芯片技术，全基因组扫描拷贝数变异（CNV）和杂合性缺失（LOH）。
• 检测内容：
  • 微缺失综合征：如Prader-Willi综合征（15q11-q13缺失）、Angelman综合征。
  • 致病性CNV：与自闭症、智力障碍相关的基因组失衡。
• 分辨率：可达50-100 Kb，检出率比核型分析高10-15%。
• 适用人群：不明原因发育迟缓、多发畸形患儿的一线检测。

4. 下一代测序技术（NGS）

• 技术类型：
  • 全外显子组测序（WES）：检测编码区单核苷酸变异（SNV）。
  • 全基因组测序（WGS）：覆盖全基因组，包括非编码区。
• 临床应用：
  • 单基因病诊断（如脊髓性肌萎缩症、囊性纤维化）。
  • 复杂疾病的遗传易感性分析（如乳腺癌BRCA1/2突变）。

二、检测项目的选择与临床意义

1. 产前诊断

• 核型分析：适用于高龄孕妇（>35岁）或超声异常胎儿。
• NIPT（无创产前检测）：通过母血游离DNA筛查常见三体，但需核型或FISH确诊。
• CMA：推荐用于超声结构异常胎儿的全面评估。

2. 生殖遗传

• 反复流产夫妇：核型分析排查平衡易位携带者。
• 男性无精症：Y染色体微缺失（AZF区域）FISH检测。

3. 肿瘤遗传学

• 实体瘤：CMA检测拷贝数变异指导靶向治疗（如HER2扩增）。
• 血液肿瘤：FISH检测特定融合基因（如PML-RARA融合于急性早幼粒白血病）。

4. 儿童遗传病

• 智力障碍/自闭症：CMA为首选，检出致病性CNV的比例达15-20%。
• 多发畸形：核型分析与CMA联合应用。

三、检测流程与注意事项

1. • 外周血（淋巴细胞培养）。
   • 羊水、绒毛（产前诊断）。
   • 骨髓或实体瘤组织（肿瘤检测）。
2. • 核型分析无法检测低比例嵌合体（<5-10%）。
   • CMA不能检测平衡易位或单亲二倍体（需结合STR分析）。
3. • 需区分临床意义明确的变异（致病性/可能致病性）与意义未明变异（VUS）。
   • 家系验证（如父母样本）对判定新生变异至关重要。

四、未来发展方向

结语