1. 传统培养法
- 培养基选择：使用含选择性抑制剂的增菌液（如FB1培养基）抑制杂菌，富集李斯特菌。
- 显色培养基：如CHROMagar™，通过菌落颜色（蓝绿色）初步鉴别。
- 选择性琼脂平板：如PALCAM琼脂或牛津琼脂，观察典型菌落形态（黑色晕轮、凹陷中心）。
- 关键项目：
- 过氧化氢酶试验（阳性）
- 溶血活性（羊血琼脂β-溶血）
- 碳水化合物发酵（如葡萄糖、鼠李糖阳性，木糖阴性）
2. 分子生物学检测
- 靶基因检测：
- hly（溶血素O基因）：特异性标记。
- prfA（毒力调控基因）
- inlA（侵袭素基因）
- 多重PCR：同步检测多种毒力因子，提升准确性。
- 快速定量检测，适用于高通量筛查（如食品加工环境监测）。
- 用于暴发溯源及耐药性分析，精确识别菌株遗传特征。
3. 免疫学方法
- ELISA试剂盒：检测菌体抗原或溶血素蛋白。
- 免疫磁珠分离（IMS）：通过抗体标记磁珠富集样本中的目标菌，提高灵敏度。
4. 质谱技术（MALDI-TOF MS）
- 基于蛋白指纹图谱快速鉴定至种水平，适用于临床微生物实验室。
5. 血清分型
- 依据菌体（O抗原）和鞭毛（H抗原）分型，常见血清型为1/2a、1/2b、4b（与重症相关）。
- 食品工业
- 样本：乳制品、肉类、即食食品、加工环境拭子。
- 标准：遵循ISO 11290-1/-2或FDA-BAM方法。
- 临床诊断
- 样本：血液、脑脊液、胎盘组织（疑似感染者）。
- 快速检测：脑脊液PCR或血培养阳性后质谱确认。
- 环境监测
- 食品加工设备、水体的李斯特菌污染评估。
-
- 低污染水平样本的检测灵敏度不足。
- 近缘种（如无害李斯特菌）的交叉反应干扰。
- 复杂食品基质对分子检测的抑制作用。
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- 纳米技术：开发高灵敏生物传感器。
- 即时检测（POCT）：CRISPR-Cas系统与微流控芯片结合，实现现场快速诊断。
- 人工智能辅助分析：整合WGS与流行病学数据，优化溯源效率。
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