一、检测项目概述

• 食品工业：饮料、乳制品、烘焙食品的营养标签制定。
• 药品生产：糖浆、口服液等含糖制剂的质控。
• 农业生产：果蔬、蜂蜜的成熟度与品质评价。
• 科研领域：发酵产物或生物反应中糖代谢研究。

二、核心检测方法

1. 斐林试剂法（Lane-Eynon法）

• 原理：还原糖在碱性条件下与斐林试剂反应生成氧化亚铜沉淀，通过滴定法测定糖含量。
• 适用范围：适用于高糖含量的液态样品（如果汁、糖浆）。
• 特点：经典方法，需严格控制加热时间和温度；操作复杂，但成本较低。

2. 3,5-二硝基水杨酸法（DNS法）

• 原理：还原糖与DNS试剂在沸水浴中反应生成棕红色氨基化合物，通过分光光度计测定吸光度值。
• 适用范围：固体、液体样品（如谷物、发酵液）。
• 特点：操作简便、灵敏度高，可批量检测；但对非还原糖需预先水解。

3. 高效液相色谱法（HPLC）

• 原理：利用色谱柱分离样品中各糖类组分，通过示差折光检测器或蒸发光散射检测器定量分析。
• 适用范围：复杂基质样品（如含多种糖类的保健食品）。
• 特点：高选择性，可区分单糖、双糖及多糖；设备昂贵，需专业人员操作。

4. 酶解法

• 原理：采用特定酶（如淀粉酶、蔗糖酶）将非还原糖水解为葡萄糖，再通过酶电极或比色法测定总糖。
• 适用范围：含淀粉、蔗糖等需水解的样品（如乳制品）。
• 特点：特异性强，干扰少；需优化酶解条件（温度、pH）。

三、检测流程关键步骤

1. • 液体样品：稀释或离心去除杂质。
   • 固体样品：粉碎后用水或乙醇提取，过滤去除不溶物。
   • 注意：淀粉类样品需酸水解（如盐酸），蔗糖需酶解或酸解为还原糖。
2. • 配制葡萄糖标准溶液梯度（如0.1-1.0 mg/mL），测量吸光度或滴定体积，建立浓度-信号线性关系。
3. • 控制反应温度、时间及试剂比例（如DNS法中沸水浴时间需精确至分钟级）。
4. • 添加澄清剂（如中性乙酸铅）去除蛋白质、多酚等干扰成分。

四、质量控制与结果验证

• 内控标准：使用已知浓度的葡萄糖标准品进行平行实验，回收率应达95%~105%。
• 重复性测试：同一批次样品至少重复测定3次，计算相对标准偏差（RSD）≤5%。
• 方法验证：对比国标（如GB 5009.7-2016）或国际标准（如AOAC方法）进行准确性评估。

五、常见问题与解决方案

1. • 可能原因：样品未完全水解或存在其他还原性物质（如维生素C）。
   • 解决方案：延长水解时间，或加入过氧化氢消除干扰。
2. • 可能原因：斐林试剂失效或样品浓度过低。
   • 解决方案：更新试剂，浓缩样品后复测。
3. • 可能原因：色谱柱老化或流动相比例不当。
   • 解决方案：更换色谱柱，优化乙腈-水比例。

六、

• GB 5009.7-2016《食品安全国家标准 食品中还原糖的测定》
• AOAC 925.35《总糖测定方法（斐林试剂法）》
• ISO 11292:1995《速溶咖啡中总糖的测定》