一、检测原理
二、核心检测项目
1. 微生物鉴定与分型
- 尿素琼脂培养基法: 培养基含尿素和酚红指示剂。接种菌落后,产脲酶菌株分解尿素释放氨,pH升高,培养基由黄色变为桃红色(阳性)。
- 快速试纸法: 试纸浸渍尿素和pH指示剂,菌液涂抹后,颜色变化(如红→粉红)提示阳性。
- 临床分离幽门螺杆菌(胃活检样本)。
- 区分肠杆菌科细菌(如变形杆菌与大肠杆菌)。
2. 临床幽门螺杆菌感染诊断
- 尿素呼气试验(UBT): 患者口服13C13C或14C14C标记的尿素胶囊,若存在幽门螺杆菌,脲酶分解尿素生成标记CO₂,通过质谱仪或闪烁计数器检测呼气样本中的同位素含量。
3. 农业与土壤酶活性评估
- 基质显色法: 土壤样本与尿素溶液孵育,加入奈氏试剂(检测NH₃),溶液变黄至棕色为阳性,活性高低通过颜色深浅定性判断。 意义:高脲酶活性可能导致尿素过快分解,增加氮素流失风险。
4. 食品微生物安全检测
- 选择性培养基法: 食品样本接种于含尿素的显色培养基,阳性结果提示潜在污染。
三、实验步骤(以微生物鉴定为例)
- 样本处理:纯化待测菌落。
- 接种:划线接种于尿素琼脂斜面。
- 孵育:35°C培养18-24小时。
- 观察:培养基变红为阳性,不变色为阴性。
四、结果判读与注意事项
- 假阳性:可能由培养基污染或过度孵育导致。
- 假阴性:温度不适宜或菌量不足。
- 质量控制:同步使用已知阳性和阴性菌株对照。
五、应用领域扩展
- 环境监测:评估水体中微生物活性。
- 工业酶生产:筛选高产脲酶菌株。
六、总结
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