一、检测项目概述

1. • 评估受试物直接接触眼组织（角膜、结膜、虹膜）后的急性刺激性或腐蚀性。
   • 预测人体暴露后可能引发的眼部炎症、红肿、溃疡等不良反应。
2. • 化学品：工业原料、农药、溶剂等。
   • 日化用品：洗发水、染发剂、护肤品等。
   • 医疗器械：接触眼部的液体或材料（如隐形眼镜护理液）。
   • 药品：滴眼液、眼膏等局部用药的辅料或活性成分。
3. • OECD TG 405（经济合作与发展组织化学品测试指南）。
   • ISO 10993-10（医疗器械生物学评价第10部分：刺激与皮肤致敏试验）。
   • 中国《化妆品安全技术规范》（2021年版）中的急性眼刺激/腐蚀性试验方法。

二、主要检测项目与方法

1. 体内试验（传统动物试验）

• 原理：将受试物滴入实验动物（通常为家兔）结膜囊，观察72小时至21天的眼部反应。
• 检测指标：
  • 角膜损伤：浑浊度、溃疡面积。
  • 结膜炎症：充血、水肿、分泌物。
  • 虹膜反应：充血、肿胀、瞳孔反射异常。
• 评分标准：按Draize评分系统（0~110分）量化损伤程度（表1）。

• 减少动物用量：采用阶梯式测试策略，优先通过体外筛选减少动物实验。

2. 体外替代试验（替代动物试验）

• 重建角膜模型试验（如EpiOcular™、SkinEthic™）：
  • 使用人工培养的角膜上皮细胞评估细胞毒性（MTT法检测细胞存活率）。
• 鸡胚绒毛尿囊膜试验（HET-CAM）：
  • 观察受试物对血管的刺激反应（出血、凝血、血管溶解）。
• 细胞毒性试验（如中性红摄取法）：
  • 通过细胞膜通透性变化评估刺激性。
• 离体动物眼球试验：
  • 使用屠宰场来源的牛、猪眼球进行短期暴露测试。

三、试验流程与关键步骤

1. • 液体直接测试，固体需溶解或研磨成细粉（粒径≤100μm），pH值需调整至接近眼表生理环境（pH 6.5~8.5）。
2. • 剂量选择：单次给予0.1mL液体或100mg固体。
   • 观察时间点：1小时、24小时、48小时、72小时及恢复期（7~21天）。
   • 对照设置：阴性对照（生理盐水）、阳性对照（1%十二烷基硫酸钠）。
3. • 重建角膜模型：暴露时间通常为1小时，检测细胞活性（IC50值）。
   • HET-CAM试验：评分标准基于血管损伤程度（0~21分）。

四、结果判定与分类

1. • 无刺激性：Draize总分≤1（72小时）。
   • 轻刺激性：总分2~15。
   • 中刺激性：总分16~25。
   • 强刺激性/腐蚀性：总分≥25或不可逆损伤（如角膜穿孔）。
2. • 重建角膜模型：细胞存活率≥50%判定为无刺激性。
   • HET-CAM试验：评分≥10分提示强刺激风险。

五、应用与报告输出

1. • 受试物信息（理化性质、浓度）、试验方法、观察数据、评分结果及。
   • 对产品标签的警示建议（如“避免接触眼睛”）。
2. • 化妆品备案：中国《化妆品注册备案资料管理规定》要求提供眼刺激数据。
   • 化学品注册（如REACH法规）：欧盟要求对吨位≥1吨/年的物质进行眼刺激评估。

六、检测技术的新趋势

1. 器官芯片技术：模拟人眼角膜微生理环境，结合流体剪切力与细胞共培养。
2. 计算机预测模型（QSAR）：基于化合物结构预测刺激性，减少实验依赖。

七、试验的局限性

• 种属差异：兔眼与人眼在泪液分泌、角膜厚度等方面存在差异。
• 体外模型局限性：无法完全模拟神经炎症或免疫反应。

结语