狂犬病检测：守护生命的最后防线

狂犬病是由狂犬病毒引起的致死性人畜共患病，病死率接近100%。当被可疑动物咬伤或抓伤后，及时进行狂犬病检测与暴露后预防处置，是阻断病毒传播、挽救生命的关键环节。我国每年约有1500万人接受狂犬病暴露后处置，规范的检测流程和诊断技术直接关系到公共卫生安全。

一、核心检测项目与方法

1. 直接荧光抗体法（DFA） 作为WHO推荐的金标准检测方法，通过荧光标记抗体检测感染组织中的病毒抗原，具有特异性强、敏感性高的特点，适用于脑组织样本的死后确诊。

2. 逆转录聚合酶链反应（RT-PCR） 能够检测唾液、脑脊液等样本中的病毒RNA，尤其适用于活体检测。最新一代实时荧光定量PCR可将检测灵敏度提升至1-10个病毒拷贝/μl。

3. 病毒分离培养 采用小鼠神经母细胞瘤（NA）细胞或乳鼠接种法进行病毒培养，阳性结果具有确诊价值，但需要生物安全三级实验室支持。

4. 血清学检测 检测血清中病毒中和抗体（VNA），适用于疫苗接种效果评估。WHO建议采用快速荧光灶抑制试验（RFFIT）或荧光抗体病毒中和试验（FAVN）。

二、临床检测实施要点

检测时机选择： • 暴露后检测：咬伤后立即采集动物脑组织（需人道处死）或唾液样本 • 暴露前监测：高风险职业人群定期抗体检测 • 临床诊断：出现恐水、畏光等典型症状时检测脑脊液

样本采集规范： 脑组织应取小脑、海马回等病毒富集区，唾液样本需连续采集3天，血清样本需双份（急性期和恢复期）。所有操作必须符合生物安全三级防护标准。

三、检测结果解读原则

1. 阳性判定： 任一检测方法发现病毒抗原/核酸，或病毒分离成功即可确诊。抗体检测需结合疫苗接种史，单纯IgG阳性不能作为诊断依据。

2. 阴性处理： 需综合暴露史、临床症状综合判断。对于深部咬伤或头面部暴露，即使检测阴性仍建议完成暴露后预防。

3. 灰区结果： 当PCR的Ct值处于临界范围时，应进行重复检测或不同靶标验证，避免假阴性导致的处置延误。

四、特殊情形处置策略

• 免疫缺陷患者：需延长观察期至3个月，定期监测中和抗体水平 • 延迟就诊病例：超过24小时的Ⅲ级暴露仍建议接种疫苗并联合被动免疫 • 野生动物暴露：无论检测结果均应启动暴露后预防

在检测技术快速发展的今天，纳米孔测序、数字PCR等新技术正在提升检测效能。但需牢记：暴露后预防永远优先于实验室检测，规范的伤口处理与疫苗接种仍是防控狂犬病的根本措施。