致畸试验检测项目详解

一、母体相关检测

1. • 体重及摄食量：记录妊娠期母体体重变化及食物消耗量，间接评估毒性对母体代谢的影响。
   • 临床观察：包括活动状态、毛发、呼吸、排泄物等异常，判断母体中毒症状。
   • 器官重量与病理检查：解剖后测定肝脏、肾脏、脾脏等器官重量，观察组织病理学变化（如坏死、炎症）。
2. • 妊娠率与黄体数：评估受试物对母体受孕能力的影响。
   • 着床数：统计子宫内胚胎着床点数量，反映胚胎早期存活情况。

二、胚胎/胎儿检测

1. • 活胎数、死胎数、吸收胎数：计算胚胎死亡率及吸收率。
   • 胎仔体重与体长：测量胎仔体重、顶臀长（Crown-Rump Length），评估整体发育迟缓。
   • 性别比例：分析性别比例失衡是否与受试物相关。
2. • 外部畸形（肉眼及解剖显微镜观察）：
     • 头部畸形（无脑、脑膨出、小头畸形）。
     • 面部畸形（唇裂、腭裂、眼睑闭合不全）。
     • 四肢畸形（短肢、缺趾、多趾、关节异常）。
     • 尾部畸形（短尾、卷尾）。
   • 内脏畸形（Barrow染色法或显微解剖）：
     • 心血管系统（室间隔缺损、大血管错位）。
     • 神经系统（脊柱裂、脊髓空洞）。
     • 泌尿生殖系统（肾缺失、尿道下裂）。
   • 骨骼畸形（茜素红染色骨骼标本）：
     • 骨化延迟（颅骨、胸骨、指骨骨化点数减少）。
     • 骨骼形态异常（肋骨分叉、椎骨融合、胸骨裂）。
3. • 胎盘重量、形态（如血肿、钙化）及组织结构异常。

三、数据分析与评估

1. • 剂量-反应关系：计算畸形发生率（%）、胎仔平均畸形数，判断效应与剂量的相关性。
   • 显著性检验：通过t检验、卡方检验对比实验组与对照组差异（如p<0.05为显著）。
2. • 阳性判断：畸形率显著升高且存在剂量依赖性，或出现对照组未见的特异性畸形。
   • 阴性判断：畸形率与对照组无差异，且母体无明显毒性（避免假阴性）。

四、试验设计要点

1. • 常用物种：大鼠（OECD 414标准）、家兔（敏感性强）、小鼠。
   • 给药时间：覆盖器官形成期（大鼠妊娠第6-15天，家兔第6-18天）。
2. • 高剂量：诱导母体轻度毒性（如体重下降≤10%）。
   • 中/低剂量：评估无毒性效应水平（NOAEL）。
   • 阳性对照：维生素A（致畸）或阿司匹林（骨骼异常）。

五、局限性及替代方法

• 种属差异：动物结果外推至人类需谨慎（如沙利度胺在家兔中致畸，大鼠不敏感）。
• 替代技术：胚胎干细胞试验（EST）、微生理体外模型（减少动物使用）。