ABO血型鉴定检测：原理、方法及临床应用

一、ABO血型鉴定的基本原理

• A型：红细胞含A抗原，血浆中含抗B抗体。
• B型：红细胞含B抗原，血浆中含抗A抗体。
• AB型：红细胞同时含A、B抗原，血浆中无抗A、抗B抗体。
• O型：红细胞无A、B抗原，血浆中含抗A和抗B抗体。

二、检测项目及方法

1. 正向定型（红细胞抗原检测）

1. 制备待检红细胞悬液（浓度通常为2%-5%）。
2. 在玻片或试管中分别加入抗A、抗B试剂。
3. 加入红细胞悬液，混匀后观察凝集现象。
4. 结果判读：
   • 凝集：抗原存在（如抗A凝集则为A抗原阳性）。
   • 无凝集：抗原阴性。

• 玻片法：快速简便，适用于急诊，但灵敏度较低。
• 试管法：通过离心增强反应灵敏度，结果更可靠。
• 微柱凝胶法：利用凝胶介质分离凝集与非凝集细胞，自动化程度高，结果精准。

2. 反向定型（血浆抗体检测）

1. 分离待检血浆或血清。
2. 将A型、B型标准红细胞分别与待检血浆混合。
3. 离心后观察凝集或溶血现象。
4. 结果判读：
   • 凝集：对应抗体存在（如A型红细胞凝集，提示血浆含抗A抗体）。

• 新生儿（<6个月）或免疫缺陷患者因抗体水平低，可能不适用反向定型。
• 需使用新鲜标准红细胞（保存期≤7天），避免假阴性。

3. 补充试验（疑难血型鉴定）

• 吸收放散试验：鉴定弱A/B抗原。
• 唾液血型物质检测：通过分泌型个体的唾液验证抗原类型。
• 分子生物学方法：PCR检测ABO基因型，适用于复杂病例。

三、质量控制要点

1. 试剂与设备：
   • 抗A、抗B试剂需符合效价标准（≥1:128），避免交叉反应。
   • 定期校准离心机转速（通常为1000×g，1分钟）和温度控制设备。
2. 样本处理：
   • 全血样本需抗凝（EDTA或枸橼酸盐），避免溶血或纤维蛋白干扰。
   • 红细胞悬液浓度需精确，过高易导致假阴性。
3. 操作规范：
   • 严格区分抗A、抗B试剂，避免污染。
   • 凝集判读需在光照充足条件下进行，弱凝集需显微镜确认。

四、常见干扰因素及处理

五、临床意义

1. 输血安全：ABO血型不合可引发急性溶血反应，鉴定错误可能致命。
2. 器官移植：供受体ABO血型需相容（除非特殊免疫方案）。
3. 新生儿溶血病（HDN）：母亲与胎儿ABO血型不合可能引发溶血，需产前筛查。
4. 法医学应用：个体识别和亲子鉴定的辅助依据。

六、技术进展与展望

• 自动化检测系统：微流控芯片、全自动血型分析仪提升效率。
• 分子分型技术：通过PCR-SSP或基因测序精准鉴定ABO亚型。
• 床边快速检测（POCT）：免疫层析试纸条适用于偏远地区。

总结