多糖检测技术及其重要性
多糖是由单糖通过糖苷键连接形成的高分子化合物,广泛存在于动植物、微生物及食品中,具有抗氧化、免疫调节、降血糖等重要生物活性。在医药、食品、化妆品等领域,多糖的质量控制直接影响产品功效与安全性。多糖检测项目旨在通过科学方法对多糖的组成、含量、结构及功能进行系统分析,为研发、生产及质控提供关键数据支持。
1. 多糖定性检测
通过显色反应(如苯酚-硫酸法、蒽酮-硫酸法)或薄层色谱法(TLC)确定多糖的存在,辅以红外光谱(FT-IR)鉴定特征官能团(如羟基、糖苷键)。近年更多采用分子排阻色谱(SEC)结合多角度激光光散射(MALS)实现分子量分布分析。
2. 多糖定量分析
苯酚-硫酸法作为经典方法,通过显色反应在490nm测定总多糖含量;DNS法(3,5-二硝基水杨酸法)则特异性检测还原糖。高效液相色谱(HPLC)配合蒸发光散射检测器(ELSD)可实现特定单糖组分的精准定量。
3. 多糖结构解析
采用甲基化分析结合气相色谱-质谱联用(GC-MS)确定糖苷键连接方式,核磁共振(NMR)技术(1H、13C及二维谱)解析多糖主链和支链结构。X射线衍射(XRD)用于研究多糖晶体构型。
4. 多糖纯度检测
通过聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)观察条带单一性,高效凝胶渗透色谱(HPGPC)分析分子量分布均一性。紫外-可见分光光度法(UV-Vis)检测蛋白质(280nm)和核酸(260nm)残留量,确保纯度≥95%。
5. 功能活性评价
包括体外抗氧化实验(DPPH/ABTS自由基清除率)、免疫细胞增殖试验、流式细胞术检测免疫调节功能,以及动物模型验证降血糖、抗肿瘤等活性,建立结构与功能的构效关系模型。
随着LC-MS/MS、MALDI-TOF等齐全技术的应用,多糖检测正朝着精准化、高通量方向发展,为功能食品开发与新药研发提供更强大的技术支撑。

