引言

N-去乙基红地那非（N-desethyl sildenafil）是红地那非（sildenafil，俗称“伟哥”活性成分）的一种关键代谢产物，在医药、兴奋剂控制和食品安全领域具有重要检测意义。作为一种磷酸二酯酶5抑制剂，N-去乙基红地那非在人体代谢过程中产生，常被用于监测运动员是否违规使用兴奋剂，或在保健品、食品中非法添加以增强“壮阳”效果，可能导致心血管风险等健康问题。近年来，随着兴奋剂事件频发和非法保健品泛滥，其检测需求急剧上升。有效的检测不仅能保障体育竞赛的公平性，还能预防公共卫生事件，例如世界反兴奋剂机构（WADA）和中国国家药品监督管理局均将其列为重点监控物质。本文将系统阐述N-去乙基红地那非的检测项目、仪器、方法及标准，为实验室检测提供参考依据。

检测项目

检测项目主要针对N-去乙基红地那非的定性与定量分析。定性检测旨在确认样品中是否存在该物质，例如通过特征峰或分子结构识别；定量检测则测量其浓度水平，如尿液或血液中的含量（单位为 ng/mL）。在体育领域，重点检测运动员生物样本中的残留量是否超标（WADA阈值通常为 50 ng/mL）；在食品安全中，则关注食品、保健品中的非法添加量是否违反法规限值。检测项目还包括样品类型适应，如尿液、血液、固体食品的预处理要求。

检测仪器

检测仪器以高灵敏度和高特异性设备为主，包括液相色谱-质谱联用仪（LC-MS/MS），这是当前最常用的核心仪器，能实现痕量水平（低至 0.1 ng/mL）的准确检测；气相色谱-质谱联用仪（GC-MS）适用于挥发性样品分析；紫外-可见分光光度计（UV-Vis）用于初步筛查；此外，固相萃取系统（SPE）用于样品前处理。辅助仪器如离心机、氮吹仪和精密天平确保样品制备准确性。现代实验室通常采用LC-MS/MS作为首选，因其抗干扰能力强，结合三重四极杆技术可有效区分代谢物。

检测方法

检测方法分为样品前处理与分析两步。前处理包括：样品提取（如使用甲醇或乙腈溶剂萃取生物流体），净化（通过C18固相萃取柱去除杂质），浓缩（氮吹干燥后复溶）。分析方法以LC-MS/MS为主：色谱分离采用反相C18柱，流动相为乙腈-水梯度洗脱；质谱检测设置多反应监测模式（MRM），母离子 m/z 475 转为子离子 m/z 100 和 283 进行定性，同时建立标准曲线（浓度范围 1–100 ng/mL）定量。方法验证需满足线性（R²>0.99）、精密度（RSD<10%）和回收率（85–115%）要求。

检测标准

检测标准遵循国际和国家级法规，世界反兴奋剂机构（WADA）的《禁止清单》和《技术文件》规定阈值（如尿液中N-去乙基红地那非浓度上限为50 ng/mL）及方法要求（ISO 17025认证）。中国国家标准如GB/T 20748-2018（动物源性食品中红地那非残留检测）和《中国药典》通则2341（质谱法通则）提供详细操作规范。其他标准包括欧盟指令2002/657/EC（分析方法验证准则）和FDA指南，强调检测限（LOD≤0.5 ng/mL）和定量限（LOQ≤1 ng/mL）。所有标准均要求实验室通过 或等效认证以确保结果可追溯。