游离脂肪酸（以油酸计）检测概述

游离脂肪酸（Free Fatty Acids, FFA）是油脂或含油食品中甘油三酯水解产生的酸性物质，其含量是评价油脂新鲜度、酸败程度及质量优劣的关键指标之一。在油脂精炼、食品加工、饲料生产及生物柴油等领域，准确测定游离脂肪酸含量至关重要。检测结果“以油酸计”，是一种标准化的表示方法，即将所有检测出的游离脂肪酸（如棕榈酸、亚油酸、硬脂酸等）的含量，统一折算成最具有代表性的油酸（C18:1）的质量或摩尔数来表示。这便于不同来源、不同组成的油脂样品之间的比较和质量控制。FFA含量过高不仅影响油脂的风味、色泽和稳定性，还会降低其营养价值和使用价值，因此建立准确、高效的检测方法意义重大。

检测项目

本检测项目为：游离脂肪酸含量（以油酸计）。检测结果通常表示为：样品中游离脂肪酸的质量分数（% FFA as oleic acid），即每百克样品中所含游离脂肪酸（以油酸计）的克数（g/100g）。核心目标是定量测定样品中所有游离脂肪酸的总酸值，并将其统一表示为油酸的当量。

检测仪器

进行游离脂肪酸（以油酸计）检测，根据所选方法不同，主要涉及以下仪器设备：

• 滴定法（最常用）：
  • 分析天平（精度0.0001g）
  • 锥形瓶（250mL）
  • 碱式滴定管（25mL 或 50mL，精度0.1mL）
  • 移液管（或自动移液器）
  • 恒温水浴锅（用于加热溶解或恒温反应）
  • 磁力搅拌器（可选）
• 电位滴定法（精度更高，适用于深色样品）：
  • 自动电位滴定仪（配备pH复合电极或专用滴定电极）
  • 磁力搅拌器
• 气相色谱法（可测定具体脂肪酸种类）：
  • 气相色谱仪（配备火焰离子化检测器 - FID）
  • 毛细管色谱柱（如聚乙二醇固定相）
  • 衍生化装置（如进行脂肪酸甲酯化）
  • 微量注射器
• 分光光度法（较少用）：
  • 紫外-可见分光光度计
  • 比色皿

检测方法

目前应用最广泛的标准方法是滴定法，其原理基于酸碱中和反应：

1. 样品准备： 将油脂样品充分混匀。准确称取一定量（根据预估酸值，通常1-10g）样品于干燥的锥形瓶中。
2. 溶解： 加入适量（通常50-100mL）预先中和至中性的乙醇-乙醚混合溶剂（1:1，V/V）或异丙醇，温热并振摇使样品完全溶解。若油脂颜色较深，可加入少量酚酞指示剂后，用稀碱液预中和至浅粉色（不计体积）。
3. 滴定： 向溶液中加入酚酞指示剂数滴（或使用酚红或溴百里酚蓝等）。用标准化的氢氧化钾（或氢氧化钠）乙醇溶液（常用浓度0.1mol/L）滴定，边滴定边不断振摇（或磁力搅拌），直至溶液呈现浅粉色（或所用指示剂的终点颜色），并在30秒内不褪色为止。
4. 空白试验： 在相同条件下，做溶剂空白试验。
5. 结果计算：

   游离脂肪酸含量（以油酸计，%） = [ (V - V0) × C × M × 100 ] / (m × 1000)

   • V： 滴定样品消耗的氢氧化钾标准溶液体积 (mL)
   • V0： 滴定空白消耗的氢氧化钾标准溶液体积 (mL)
   • C： 氢氧化钾标准溶液的准确浓度 (mol/L)
   • M： 油酸的摩尔质量 (282.47 g/mol)
   • m： 样品质量 (g)

电位滴定法操作流程类似滴定法，区别在于使用电位滴定仪自动判断滴定终点（通常是pH 8.5-9.5或拐点），适用于颜色深、浑浊或难以用指示剂判断终点的样品，结果更客观准确。

气相色谱法则先将样品中的游离脂肪酸（或总脂肪酸）衍生化为脂肪酸甲酯（FAME），然后通过色谱柱分离，FID检测器定量各个脂肪酸组分。最后将测得的各游离脂肪酸含量按分子量折算成油酸的当量加和。此方法可提供具体脂肪酸组成信息，但操作较复杂，成本较高。

检测标准

游离脂肪酸（以油酸计）的检测遵循国内外多项标准，主要标准包括：

• 中国国家标准 (GB):
  • GB 5009.229-2016 《食品安全国家标准 食品中酸价的测定》： 这是现行最常用的国家标准，规定了食用油脂、含油食品（经油提取后）中酸价（包括滴定法和电位滴定法）的测定方法。酸价（Acid Value, AV）定义为中和1克油脂中的游离脂肪酸所需氢氧化钾的毫克数。其与FFA（以油酸计%）的换算关系为：FFA (%) = AV × 0.503（基于油酸计算）。该标准是食品安全抽检的法定依据。
  • GB/T 5530-2005/ISO 660:2020 《动植物油脂 酸值和酸度测定》： 等效或修改采用ISO标准，更侧重于油脂原料及产品本身的检测。
• 国际标准 (ISO):
  • ISO 660:2020 《Animal and vegetable fats and oils — Determination of acid value and acidity》： 国际通用的动植物油脂酸值（AV）和酸度（以油酸质量分数表示）测定标准（滴定法和电位滴定法）。
• 美国油脂化学家协会标准 (AOCS):
  • AOCS Official Method Ca 5a-40 《Free Fatty Acids》： 美国油脂行业广泛采用的标准方法，明确要求结果报告为“% Free Fatty Acids as Oleic Acid”。
• 其他相关标准： 如药典（如ChP, USP, EP）对于药用油脂中酸值的测定也有相应规定。

注意事项：

• 溶剂必须预先中和至中性。
• 滴定过程需快速稳定，避免空气中CO₂的干扰。
• 对于深色油脂，电位滴定法或指示剂法（需预中和）更可靠。
• 结果表示必须明确注明“以油酸计”。
• 严格遵守所选标准方法的详细步骤和条件（如溶剂选择、温度、称样量、滴定液浓度等）。