溶出性抗（抑）菌产品抑菌性能试验检测

溶出性抗（抑）菌产品是指通过释放其含有的有效抗菌成分到环境中（如溶液、物体表面或皮肤表面）来实现抑菌或杀菌作用的一类产品，包括消毒液、抗菌洗手液、抗菌织物处理剂、缓释型抗菌材料等。其核心特征在于抗菌成分能从产品基质中持续溶出并作用于目标微生物。评估这类产品的核心抑菌效能，即“溶出性抗（抑）菌性能”，是确保其安全性和有效性的关键环节。这项检测旨在模拟产品在实际使用环境下，其溶出的活性成分对特定致病菌或指示菌的抑制或杀灭能力，为产品研发、质量控制、上市许可及市场监管提供科学依据。

检测项目

溶出性抗（抑）菌性能检测的核心项目通常包括：

1. 定性抑菌试验： 主要评估产品溶出成分是否具有抑制微生物生长的能力。常用方法如抑菌环试验（琼脂扩散法），通过测量抑菌环的大小初步判断抑菌活性的强弱。
2. 定量抑菌试验： 精确测定产品溶出成分抑制或杀灭微生物所需的量或浓度。这是评价产品效能的金标准，主要包括：
    • 最小抑菌浓度测定： 测定在特定条件下，能完全抑制指示菌生长的最低产品浓度或其溶出液浓度。
    • 最小杀菌浓度测定： 测定在特定条件下，能杀死≥99.9%指示菌的最低产品浓度或其溶出液浓度。
    • 杀菌率/抑菌率测定： 在设定的作用时间和浓度下，计算产品对微生物的杀灭或抑制百分比。
3. 持续性抑菌效果评价： 评估产品溶出成分在作用后是否能在一定时间内维持其抑菌效果（残留活性）。

检测仪器

进行溶出性抗（抑）菌性能检测需要依赖一系列专业仪器设备：

• 生物安全柜： 提供无菌操作环境，保障实验人员安全，防止微生物污染。
• 恒温培养箱： 用于微生物的复苏、传代及试验后的培养，提供稳定的温度和湿度条件。
• 高压蒸汽灭菌器： 对实验器械、培养基、稀释液等进行彻底灭菌。
• 精密天平： 精确称量样品、培养基成分等。
• 移液器及枪头： 精确移取液体样品、菌悬液、培养基等，需无菌。
• 振荡器/混匀仪： 用于混匀菌悬液、样品溶液等。
• pH计： 检测和调节样品溶液或培养基的pH值，因为pH可能显著影响抑菌活性。
• 菌落计数器/自动菌落计数仪： 准确计数平板上的菌落形成单位。
• 游标卡尺： 用于测量抑菌环直径（定性试验）。
• 分光光度计： 用于测定菌悬液浓度（麦氏比浊法）。

检测方法

检测方法的选择需依据产品特性、预期用途及标准要求。主要方法有：

1. 琼脂扩散法（定性 - 抑菌环试验）：
    a) 制备含特定浓度指示菌的琼脂平板。
    b) 将待测产品（或其溶出液）以特定方式（如滤纸片、牛津杯、打孔）置于已接种的琼脂表面。
    c) 恒温培养一定时间。
    d) 测量并记录抑菌环（透明圈）的直径。直径越大，通常表示溶出的抑菌成分活性越强或浓度越高。

2. 肉汤稀释法（定量 - MIC/MBC）：
    a) 在无菌试管或微孔板中，用肉汤培养基对样品进行一系列倍比稀释。
    b) 向每个稀释度的样品管（孔）中加入等量、特定浓度的指示菌悬液。
    c) 恒温培养一定时间。
    d) 观察结果：肉眼观察浊度或使用仪器检测吸光度，无肉眼可见生长（浊度）的最低浓度即为MIC。将MIC及以上浓度的无生长管（孔）内容物转种至不含抑菌成分的新鲜琼脂平板上，培养后无任何菌落生长的最低浓度即为MBC。
3. 悬液定量法（定量 - 杀菌率/抑菌率）：
    a) 将一定浓度的指示菌悬液与不同浓度的待测样品溶液（或其溶出液）在特定温度下作用规定时间。
    b) 立即加入中和剂终止反应（中和验证试验必须通过）。
    c) 取适量混合液进行系列稀释。
    d) 倾注平板或涂布平板，培养后计数存活菌落数。
    e) 同时设置阳性对照（菌悬液+稀释液）和阴性对照（培养基）。
    f) 计算杀菌率/抑菌率：杀菌率(%) = [(阳性对照平均菌落数 - 试验组平均菌落数) / 阳性对照平均菌落数] × 100%。

检测标准

进行溶出性抗（抑）菌产品抑菌性能试验必须严格遵循相关国家或行业标准，以保证结果的科学性、可比性和权威性。主要参考标准包括：

• GB 15979-2002 《一次性使用卫生用品卫生标准》： 附录C规定了抗菌（或抑菌）产品的抑菌性能试验方法（主要包括定性抑菌环试验和定量悬液试验的基本框架）。
• 《消毒技术规范》（卫生部）： 尤其是其关于消毒剂实验室、模拟现场和现场消毒效果鉴定试验的方法中，包含了大量适用于溶出性消毒产品（属抗抑菌产品大类）的定量试验方法（如悬液定量杀菌试验、载体浸泡定量杀菌试验等），对试验菌种选择、菌悬液制备、中和剂选择与鉴定、试验重复次数、结果计算与评价等有详细规定。
• WS/T 650-2019 《抗菌和抑菌效果评价方法》： 该卫生行业标准更系统地规定了抗菌和抑菌产品的效果评价方法，包括抑菌环试验、最小抑菌浓度（MIC）测定、最小杀菌浓度（MBC）测定、定量悬浮试验、重复抑菌效果试验（评价持续性）等方法的具体操作步骤和评价要求，是当前评价溶出性抗（抑）菌产品性能的最新、最全面的重要标准之一。
• ISO/CEN 等国际标准： 如ISO 20743（纺织品抗菌性测定）、ISO 22196（塑料表面抗菌性测定）等，对于特定类型的溶出性产品（如抗菌纺织品、抗菌塑料）也有相应的国际方法标准可供参考。