压力蒸汽灭菌器灭菌效果监测检测

压力蒸汽灭菌器是医疗机构、实验室和制药等行业中不可或缺的关键设备，主要用于杀灭医疗器械、实验器皿等物品上携带的微生物，包括细菌、病毒、真菌及其芽孢等，确保其达到无菌状态，对预防和控制医院感染、保障手术安全、保证实验结果的准确性以及药品生产安全具有至关重要的作用。然而，灭菌过程的有效性并非绝对可靠，可能受到设备性能（如温度均匀性、蒸汽饱和度）、装载方式、包装材料、灭菌参数（温度、压力、时间）设定以及生物指示剂失效等多种因素的影响。因此，建立一套科学、系统且严格的灭菌效果监测体系，定期进行监测检测，是验证灭菌效果、确保灭菌过程可靠性的途径，也是保障患者安全和产品质量的核心防线。

检测项目

压力蒸汽灭菌效果的监测检测主要包括以下几类项目：

• 物理监测： 对灭菌器运行过程中的关键物理参数进行实时监测和记录，主要包括温度（必须达到并维持设定的灭菌温度，如121°C或134°C）、压力（维持相应的饱和蒸汽压力）、时间（维持设定温度下的有效灭菌时间）。完善的物理监测设备（如温度-时间记录仪）能提供灭菌循环是否按预设参数运行的客观证据。
• 化学监测： 利用化学指示剂（Chemical Indicators， CIs）的特性（如热敏染料或特种墨水）在特定的温度、时间和（或）蒸汽作用下发生的颜色变化或形态改变（如条纹移动）来间接指示灭菌过程参数是否达到要求。根据功能不同，可分为包外指示物（过程指示物）、包内指示物（多参数指示物）和批量监测指示物（Bowie-Dick测试）。
• 生物监测： 这是灭菌效果监测的“金标准”。使用标准化的、已知高抗力的生物指示剂（Biological Indicators， BIs），通常是将一定数量（如10^5 至 10^6 CFU）的嗜热脂肪杆菌芽孢（Geobacillus stearothermophilus）负载在载体（如滤纸条）上并封装。将其置于灭菌器最难灭菌的部位（如排气口上方、大包中央）。灭菌后，将BI置于专用培养器内按说明培养。如果灭菌过程有效，所有芽孢应被杀灭，培养后指示剂应保持无菌生长状态（如培养液不变色）；若有生长（如培养液变黄），则表明灭菌失败。
• Bowie-Dick测试（排气性能测试）： 专门用于检测预真空（包括脉动真空）压力蒸汽灭菌器在灭菌周期开始前去除灭菌室内冷空气（即抽真空）的能力。使用专门设计的测试包（通常由特定数量、特定折叠方式的纯棉布巾组成）和Bowie-Dick测试图（化学指示图）。测试图图案的均匀变化表明冷空气排除良好；出现不均匀变化或穿透失败，则表明抽真空不彻底，存在冷空气团，可能导致灭菌失败。

检测仪器

进行上述监测检测需要依赖特定的仪器设备：

• 物理参数记录仪（数据记录仪）： 带有可放置在灭菌器腔室内最难灭菌位置（如排水口上方）的温度探头和压力传感器，能连续、实时地记录整个灭菌过程中的温度、压力随时间变化的曲线。
• 生物指示剂培养器（阅读器）： 专用于培养和判读生物指示剂的设备。通常为恒温培养箱，设定在生物指示剂要求的特定温度（如嗜热脂肪杆菌一般为55-60°C）。部分高级阅读器带有自动光学检测系统，能定时检测并判读培养液的颜色变化（或荧光变化），自动给出阳性/阴性结果。
• 化学指示物判读设备： 对于需要客观量化判读的化学指示物（如某些多参数指示卡），可能需要使用专门的比色计或反射光度计。
• Bowie-Dick测试包： 标准化的测试包组件（特定材质和折叠方式的布巾）和专用的Bowie-Dick测试图。

检测方法

不同监测项目的检测方法各有侧重：

• 物理监测方法： 在每次灭菌循环中启用数据记录仪，将探头放置在灭菌器厂商或规范指定的最难灭菌点（通常位于灭菌室底部近排气口处）。运行完整灭菌循环，结束后导出数据，分析其是否达到并维持了设定的温度、压力和时间要求。
• 化学监测方法： 将相应的化学指示物（包外指示胶带/标签贴在包裹外部；包内指示卡放入包裹最难灭菌的部位；批量监测指示物放入满载灭菌器的规定位置）随物品一起进行灭菌。灭菌后，立即（或冷却后）肉眼观察指示物颜色或形态的变化，并与标准色板或产品说明书上的合格标准进行比对。
• 生物监测方法：
  1. 选择合适抗力（符合标准要求）的生物指示剂。
  2. 将BI放置于灭菌挑战装置（如测试包）内，并置于灭菌器最难灭菌的位置（通常由设备厂商或规范指定）。
  3. 运行完整的灭菌循环。
  4. 灭菌结束后，尽快（按BI说明书要求）取出BI，进行无菌操作（如挤压安瓿瓶或压碎内管使培养液与芽孢载体混合）。
  5. 将激活后的BI放入设定好温度的专用培养器内。
  6. 按照生物指示剂说明书规定的培养时间（通常为24小时或48小时）进行培养。
  7. 在规定时间结束时判读结果：培养液颜色未变化（或未显示荧光）为阴性（无菌生长，灭菌合格）；培养液颜色变化（或显示荧光）为阳性（有菌生长，灭菌失败）。
• Bowie-Dick测试方法： 将Bowie-Dick测试图放入标准测试包的中心位置，测试包水平放置在灭菌车架上前1/3位置（通常是灭菌室底层近排气口处）。在灭菌器空载状态下运行专用的Bowie-Dick测试程序。程序结束后取出测试图，观察其颜色变化的均匀性。图案变色均匀一致为合格；出现不均匀变色、未穿透区域或明显的条纹/斑点则为不合格。

检测标准

压力蒸汽灭菌器灭菌效果的监测检测必须严格遵循国家和国际的相关标准规范，确保监测结果的可靠性和可比性。主要标准包括：

• 国内标准：
  • GB 8599 《大型蒸汽灭菌器技术要求 自动控制型》 (对物理监测有要求)
  • WS 310.3 《医院消毒供应中心 第3部分：清洗消毒及灭菌效果监测标准》 (强制性卫生行业标准，详细规定了医院CSSD的物理、化学、生物监测及Bowie-Dick测试的要求、频率和方法)
  • GB 18278.1 《医疗保健产品灭菌 湿热 第1部分：医疗器械灭菌过程的开发、确认和常规控制要求》(等同采用ISO 17665-1)
  • YY/T 1464 《医疗保健产品灭菌 生物指示物 选择、使用及检验结果判断指南》
  • YY/T 0802 《医疗保健产品灭菌 生物指示物 第1部分：通则》(等同采用ISO 11138-1)
  • YY/T 0802.3 《医疗保健产品灭菌 生物指示物 第3部分：湿热灭菌用生物指示物》(等同采用ISO 11138-3)
  • YY/T 0698.4 《最终灭菌医疗器械包装材料 第4部分：纸袋 要求和试验方法》等标准中涉及Bowie-Dick测试的相关规定。
• 国际标准：
  • ISO 17665-1:2006 《Sterilization of health care products — Moist heat — Part 1: Requirements for the development, validation and routine control of a sterilization process for medical devices》
  • ISO 11140-1:2014 《Sterilization of health care products — Chemical indicators — Part 1: General requirements》 及后续各部分
  • ISO 11138-1:2017 《Sterilization of health care products — Biological indicators — Part 1: General requirements》
  • ISO 11138-3:2017 《Sterilization of health care products — Biological indicators — Part 3: Biological indicators for moist heat sterilization》
  • ISO 11140-4:2007 《Sterilization of health care products — Chemical indicators — Part 4: Class 2 indicators as an alternative to the Bowie
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