猪传染性胸膜肺炎检疫检测
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猪传染性胸膜肺炎(Porcine Contagious Pleuropneumonia,PCP)是由胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,APP)引起的一种高度接触性呼吸道传染病,具有发病急、死亡率高等特点,对养猪业造成重大经济损失。由于该病可通过直接接触、空气传播或污染物间接传播,早期检疫检测成为控制疫情扩散的关键环节。通过科学规范的检测手段,能够快速识别感染个体、追溯病原传播链,并为制定免疫防控策略提供依据。
检测项目与核心内容
猪传染性胸膜肺炎的检疫检测主要包括以下项目:
1. 病原学检测:通过分离培养APP细菌或检测其特异性基因片段,直接确认病原存在;
2. 血清学检测:检测血清中APP抗体水平,评估群体免疫状态或感染历史;
3. 分子生物学检测:利用PCR、实时荧光定量PCR等技术检测病原核酸;
4. 病理组织学检测:结合剖检病变特征(如纤维素性胸膜炎、肺出血)辅助诊断。
常用检测仪器与设备
开展检测需依赖专业仪器:
- PCR仪:用于核酸扩增,检测APP特异性基因(如apxIV、omp等);
- 酶标仪:配套ELISA试剂盒完成血清抗体定量分析;
- 细菌培养箱:用于APP的分离培养与生化鉴定;
- 高速离心机:处理血液、组织样本,分离血清或DNA;
- 荧光显微镜:观察免疫荧光标记的抗原抗体反应。
标准化检测方法及流程
1. 样本采集:采集病猪肺组织、气管分泌物或血液,运输中需冷链保存;
2. 细菌分离培养:使用含NAD的巧克力琼脂培养基,37℃培养24-48小时,观察溶血现象;
3. PCR检测:提取DNA后,针对APP的apx毒素基因设计引物进行扩增;
4. ELISA检测:使用商品化试剂盒检测血清IgG抗体,判定感染阶段;
5. 病理学检查:观察肺脏实变、胸膜粘连等特征性病变,进行组织切片染色。
主要检测标准与规范
检测需遵循国内外标准:
- OIE标准:《陆生动物诊断试验和疫苗手册》中APP检测指南;
- 中国国家标准:GB/T 16551-2020《猪传染性胸膜肺炎诊断技术》;
- 行业规范:推荐使用多重PCR区分APP血清型(1-18型);
- 质量控制:实验需设阴性/阳性对照,试剂盒需通过农业部认证。
通过系统化的检疫检测,能够有效监控猪群健康状态,降低疫病暴发风险,为养殖场生物安全体系的构建提供技术支撑。

