食品卫生微生物学检验中志贺氏菌检测的重要性

志贺氏菌（Shigella）是引发细菌性痢疾的主要病原体之一，其传播途径包括污染的水源、食物及人与人接触。由于志贺氏菌感染症状严重（如腹泻、发热、腹痛等），且具有高度传染性，食品中志贺氏菌的检测在食品安全和公共卫生领域至关重要。在食品加工、流通及消费环节中，一旦食品被志贺氏菌污染，可能引发群体性食源性疾病，甚至造成区域性公共卫生事件。因此，建立科学、高效的志贺氏菌检验方法，是保障食品卫生安全的重要环节。

检测项目

志贺氏菌的检验主要包括以下核心项目：

• 样品采集与预处理：根据食品类型（如肉类、乳制品、即食食品）选择代表性样本，并进行均质化处理。
• 增菌培养：通过选择性培养基（如GN增菌液）富集志贺氏菌，抑制非目标菌生长。
• 选择性分离：利用SS琼脂、麦康凯琼脂等培养基分离可疑菌落。
• 生化鉴定：通过氧化酶试验、糖发酵试验等验证菌株特性。
• 血清学试验：针对志贺氏菌的4种血清群（A/B/C/D）进行分型确认。
• 分子生物学检测：采用PCR技术检测志贺氏菌特异性基因（如ipaH、ial）。

检测仪器

检测过程中需使用以下关键仪器设备：

• 生物安全柜：确保操作人员与样品间的生物隔离。
• 恒温培养箱：用于增菌培养及平板菌落孵育（通常设定35-37℃）。
• 全自动微生物鉴定系统：如VITEK 2 Compact，快速完成生化鉴定。
• PCR仪：用于核酸扩增，检测志贺氏菌特异性基因。
• 显微镜及显微成像系统：观察菌体形态及染色特性。

检测方法

志贺氏菌检验的标准化流程包括：

1. 样品处理：25g食品样本与225mL增菌液混合，均质后37℃培养18-24小时。
2. 选择性分离：取增菌液接种至SS琼脂和麦康凯琼脂，37℃培养24小时后观察菌落特征。
3. 生化试验：挑取可疑菌落进行TSI试验（三糖铁琼脂）、尿素酶试验、赖氨酸脱羧酶试验等。
4. 血清凝集试验：使用多价和单价志贺氏菌诊断血清进行玻片凝集反应。
5. 分子检测：提取细菌DNA后，通过实时荧光PCR检测ipaH基因，提升检测灵敏度与特异性。

检测标准

我国现行标准主要依据：

• GB 4789.5-2012《食品安全国家标准 食品微生物学检验 志贺氏菌检验》：规定了传统培养法与分子检测的详细步骤。
• ISO 21567:2004：国际标准化组织关于食品中志贺氏菌检测的参考方法。
• SN/T 1870-2016：出口食品中志贺氏菌的实时荧光PCR检测方法。

检测过程需严格遵循标准操作程序，确保结果准确性，同时定期进行实验室质量控制（如阳性对照、阴性对照及空白试验）。