迟发型超敏反应检测概述
迟发型超敏反应(Delayed-Type Hypersensitivity, DTH)属于IV型超敏反应,主要由T淋巴细胞介导,通常在接触抗原后24-72小时出现炎症反应。此类反应常见于接触性皮炎、结核菌素试验阳性等情况。通过检测迟发型超敏反应,可评估个体细胞免疫功能状态、诊断过敏性疾病及监测免疫抑制治疗效果。检测过程中需结合临床表现、实验室指标及标准化方法,以确保结果的准确性和临床意义。
检测项目
迟发型超敏反应检测主要包括以下项目:
1. 斑贴试验(Patch Test):用于诊断接触性皮炎,通过局部皮肤接触潜在过敏原,观察红肿、水疱等反应。
2. 结核菌素试验(Tuberculin Skin Test, TST):检测结核分枝杆菌感染或疫苗接种后的免疫记忆反应。
3. 淋巴细胞转化试验(Lymphocyte Transformation Test, LTT):体外评估T细胞对特定抗原的增殖能力。
4. 细胞因子检测:如IFN-γ、IL-2等Th1型细胞因子水平测定,反映T细胞活化状态。
检测仪器
检测过程中需使用以下核心仪器:
1. 斑贴试验器:专用铝制或塑料载体制备过敏原贴片。
2. CO2培养箱:用于淋巴细胞体外培养及增殖实验。
3. 流式细胞仪:分析T细胞亚群及活化标志物(如CD4+、CD8+、CD25+)。
4. 酶联免疫吸附测定仪(ELISA):定量检测血清或培养液中的细胞因子浓度。
5. 显微镜与成像系统:观察皮肤组织病理学变化及细胞形态。
检测方法
主要检测方法包括:
1. 体内检测法:
- 斑贴试验:将过敏原敷贴于背部皮肤48小时后移除,72小时判读局部红斑、硬结程度。
- 结核菌素皮内注射:注射5U PPD于前臂屈侧,48-72小时测量硬结直径≥10mm为阳性。
2. 体外检测法:
- 淋巴细胞增殖试验:分离外周血单个核细胞(PBMC),加入抗原刺激后,通过³H-TdR掺入法或MTT法检测增殖指数。
- ELISA/ELISPOT:定量检测IFN-γ分泌水平,评估抗原特异性T细胞应答。
检测标准
检测需遵循以下国际与国内标准:
1. 国际接触性皮炎研究组(ICDRG)指南:规范斑贴试验的抗原浓度、敷贴时间及结果判读标准。
2. WHO结核菌素试验指南:明确TST操作流程及阳性判定阈值。
3. ISO 15189医学实验室标准:要求实验室建立质量控制体系,确保细胞培养及ELISA检测的重复性。
4. 中国《超敏反应性疾病诊断指南》:规定迟发型超敏反应的临床诊断路径与实验室检测指标联合应用原则。
临床意义与注意事项
迟发型超敏反应检测在过敏性疾病鉴别诊断、免疫缺陷评估及药物安全性评价中具有重要作用。检测前需排除患者使用糖皮质激素或免疫抑制剂的影响,对于严重免疫功能低下者(如HIV感染者),可能出现假阴性结果,需结合其他免疫学指标综合判断。

