霉菌和酵母菌总数检测的意义与应用

霉菌和酵母菌总数检测是食品、药品、化妆品及环境监测等领域中至关重要的质量控制项目。这些微生物的存在可能引起产品腐败变质，甚至产生毒素威胁人体健康。例如，食品中霉菌超标可能导致黄曲霉毒素等致癌物生成，而药品中的酵母菌污染可能影响药物稳定性。通过检测样品中的霉菌和酵母菌总数，可评估生产环境的卫生状况、原料安全性及生产工艺的规范性，从而保障终产品的微生物安全性。

检测项目与适用范围

本检测项目主要针对各类样品中活体霉菌和酵母菌的总量测定，包括但不限于：

• 食品（乳制品、肉制品、果蔬制品等）
• 药品（口服制剂、外用药、原料药）
• 化妆品（膏霜类、水剂类产品）
• 环境样本（生产车间空气沉降菌、设备表面涂抹样）

主要检测仪器与设备

检测过程中需使用以下核心设备：

• 恒温培养箱：提供25-28℃的霉菌培养环境，部分标准要求双温度培养
• 生物安全柜：确保样品处理过程的生物安全性
• 菌落计数器：配备放大镜的电子计数仪或手动计数装置
• 高压灭菌锅：用于培养基及实验器具的灭菌处理
• 显微镜：400倍放大观察菌落形态确认

标准检测方法流程

依据国际通行方法，主要采用以下步骤：

1. 样品制备：无菌称取25g样品+225ml稀释液，梯度稀释至适宜浓度
2. 培养基选择：马铃薯葡萄糖琼脂（PDA）或孟加拉红培养基，添加氯霉素抑制细菌
3. 接种培养：倾注法或涂布法接种，28℃培养5-7天（霉菌）或3-5天（酵母菌）
4. 菌落计数：选择30-300CFU的平板进行统计，区分典型菌落形态
5. 确认实验：挑取可疑菌落进行镜检确认

主要检测标准规范

国内外常用标准包括：

• GB 4789.15-2016《食品安全国家标准 食品微生物学检验 霉菌和酵母计数》
• ISO 21527-1:2008《食品和动物饲料微生物学-酵母和霉菌计数》
• USP<61> 非无菌产品微生物检查：微生物计数法
• 化妆品安全技术规范（2022年版）第五章 微生物检验方法

实验需严格执行标准规定的培养温度、时间及培养基质控要求，定期使用标准菌株（如黑曲霉、白色念珠菌）进行方法验证。值得注意的是，不同基质的样品可能需要调整前处理方式，如含防腐剂产品需增加中和剂，油脂样品需添加吐温80等增溶剂。