大肠菌群和大肠杆菌的计数检测概述
大肠菌群和大肠杆菌是环境、食品及饮用水卫生检测中重要的指示微生物，其存在与数量直接反映样品的卫生状况和潜在致病风险。大肠菌群包括一组能在37°C培养24小时内发酵乳糖产酸产气的革兰氏阴性杆菌，而大肠杆菌（Escherichia coli）是大肠菌群中的特定成员，通常与粪便污染密切相关。通过对它们的计数检测，可以评估水质、食品加工环境以及产品的安全性。检测过程需遵循严格的标准化流程，以确保结果的准确性和可比性，为公共卫生管理和风险控制提供科学依据。
检测项目
大肠菌群和大肠杆菌的计数检测通常分为以下项目：
- 总大肠菌群检测：评估样品中所有符合大肠菌群定义的细菌总量；
- 耐热大肠菌群（粪大肠菌群）检测：通过44.5°C培养筛选与粪便污染相关的菌群；
- 大肠杆菌特异性检测：利用生化或分子方法确认大肠杆菌的存在及数量。
检测仪器与设备
检测过程中需使用以下关键仪器：
- 过滤装置：用于膜过滤法中的样品预处理；
- 恒温培养箱：提供37°C和44.5°C的精准温度控制；
- 紫外可见分光光度计：分析酶底物反应后的吸光度变化；
- PCR仪：用于分子生物学方法中的基因扩增；
- 菌落计数仪：自动读取平板上的典型菌落数。
检测方法
常用检测方法包括：
- 膜过滤法（MF）：将样品过滤后，滤膜置于选择性培养基上培养，统计典型菌落；
- 多管发酵法（MPN）：通过系列稀释和产气观察，利用统计表推算最可能数；
- 酶底物法：基于β-葡萄糖醛酸酶活性快速检测大肠杆菌；
- 实时荧光PCR：针对uidA等特异性基因进行定量检测。
检测标准
国内外主要检测标准包括：
- 中国国家标准（GB）：如GB 4789.3-2016《食品微生物学检验 大肠菌群计数》；
- 美国标准方法（SM）：如SM 9223《多管发酵法检测大肠菌群》；
- 国际标准化组织（ISO）：如ISO 9308-1:2014《水质 大肠杆菌和大肠菌群检测 第1部分：膜过滤法》；
- 环境保护标准（EPA）：如EPA Method 1603《水体中大肠杆菌的膜过滤检测》.
质量控制要点
检测过程中需注意：①定期对培养基进行性能验证；②设置阳性（如E. coli ATCC 25922）和阴性对照；③严格遵循无菌操作规范；④环境样品需进行干扰物质去除预处理。
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