根据GB 5009.22-2016《食品安全国家标准 食品中黄曲霉毒素B族的测定》要求，棉籽粕和花生粕中黄曲霉毒素B1（AFB1）的检测需执行以下核心步骤： ### 一、检测方法选择 1. **高效液相色谱法（HPLC）** - 检出限：0.1 μg/kg - 定量限：0.3 μg/kg - 适用于实验室常规检测 2. **酶联免疫法（ELISA）** - 快速筛查用，检出限0.5 μg/kg - 阳性样本需HPLC验证 3. **液相色谱-质谱联用法（LC-MS/MS）** - 检出限达0.02 μg/kg - 适用于仲裁检测 ### 二、关键前处理差异 | 参数 | 棉籽粕处理要点 | 花生粕处理要点 | |-------------|-------------------------------|-------------------------------| | 粉碎粒度 | 过1 mm筛（含纤维） | 过0.5 mm筛 | | 脱脂处理 | 正己烷脱脂（油脂＞5%时必做） | 正己烷脱脂（油脂＞8%时必做） | | 提取溶剂 | 甲醇-水（7:3）振荡30 min | 乙腈-水（9:1）超声20 min | | 净化方式 | MycoSep™228净化柱 | Immunoaffinity Column | ### 三、HPLC具体操作流程 1. **色谱条件** - 色谱柱：C18柱（4.6×250 mm，5 μm） - 流动相：甲醇-乙腈-0.1%甲酸水（35:15:50） - 柱温：30℃，流速1.0 mL/min - 荧光检测器：Ex 360 nm/Em 440 nm 2. **基质效应修正** - 棉籽粕需外标法定量 - 花生粕推荐基质匹配标准曲线 ### 四、质控要求 1. 每批样加标回收率应控制在80-120% 2. 棉籽粕样品需额外监控棉酚干扰（保留时间＞AFB1 2 min） 3. 花生粕检测必须同步测定AFB1水解产物（AFB2a） ### 五、判定标准 根据GB 2761-2017规定： - 棉籽粕AFB1 ≤15 μg/kg（饲用） - 花生粕AFB1 ≤20 μg/kg（食用） - 花生粕AFB1 ≤50 μg/kg（饲用） 注：检测报告需明确标注样品用途（食用/饲用），当AFB1＞5 μg/kg时需进行风险评估。