一、检测项目概述

1. • 标本类型：根据感染部位选择样本（如咽拭子、伤口分泌物、血液、脑脊液、阴道拭子等）。
   • 采集要求：无菌操作避免污染，咽拭子需深入咽后壁擦拭；B群链球菌筛查（孕妇）需采集阴道及直肠拭子。
   • 运输与保存：多数样本需立即送检，延时需使用专用运输培养基（如Amies培养基）。
2. • 革兰染色：链状排列的革兰阳性球菌，可初步提示链球菌感染，但无法区分具体类型。
   • 临床意义：快速辅助诊断，尤其在化脓性感染中结合临床症状具有提示作用。
3. • 培养基选择：
     • 血琼脂平板（5%羊血）：观察β溶血现象（完全溶血环）。
     • 选择性培养基（如哥伦比亚CNA平板）：抑制革兰阴性菌生长，提高分离率。
   • 培养条件：35-37℃、5% CO₂环境，培养24-48小时。
   • 菌落特征：A群链球菌呈灰白色小菌落，透明溶血环；B群链球菌较大，溶血环较窄。
4. • 关键生化试验：
     • A群链球菌：杆菌肽敏感试验（敏感）、吡咯烷酮芳基酰胺酶（PYR）试验（阳性）。
     • B群链球菌：CAMP试验（阳性）、马尿酸盐水解试验（阳性）。
     • 乳胶凝集试验：通过群特异性抗原（如Lancefield分群）快速鉴定A、B、C、G群链球菌。
5. • 原理：通过免疫层析或乳胶凝集法检测咽拭子中的A群链球菌抗原。
   • 优点：15-30分钟出结果，适用于门诊快速筛查。
   • 局限性：灵敏度较低（约80-90%），阴性结果需结合培养确认。
6. • PCR技术：检测特异性基因（如A群链球菌的spy1258基因、B群链球菌的cfb基因）。
   • 多重PCR或实时荧光PCR：可同时鉴别多种病原体，适用于复杂感染或脑脊液等无菌部位样本。
   • 全基因组测序（WGS）：用于暴发流行时的溯源分析。
7. • 抗链球菌溶血素O（ASO）抗体：提示近期A群链球菌感染（如风湿热、肾小球肾炎的辅助诊断）。
   • 抗DNA酶B抗体：与ASO联合检测提高敏感性。
8. • 必要性：尽管β型溶血性链球菌对青霉素普遍敏感，但对大环内酯类耐药率升高需监测。
   • 方法：CLSI推荐的微量肉汤稀释法或E试验，检测红霉素、克林霉素等药物的敏感性。

二、不同感染场景的检测策略

1. • 首选：快速抗原检测（A群链球菌）结合培养（阴性抗原结果时）。
   • 注意：儿童患者需严格筛查以避免风湿热风险。
2. • 产前筛查：孕35-37周阴道-直肠拭子培养或PCR检测。
   • 确诊：血/脑脊液培养+乳胶凝集分群。
3. • 血培养：需氧瓶+厌氧瓶联合使用，缩短报阳时间。
   • 分子检测：直接对血液样本进行PCR检测，加速诊断。
4. • 脓液培养：结合革兰染色和生化鉴定，排除金黄色葡萄球菌混合感染。

三、结果解读与临床意义

• 阳性结果：
  • 直接指导抗生素选择（如青霉素、头孢菌素）。
  • B群链球菌阳性孕妇需产时预防性用药。
• 阴性结果：
  • 排除链球菌感染时需结合临床表现（如病毒性咽炎）。
• 耐药性警示：红霉素耐药菌株需避免使用克林霉素（可能存在诱导耐药）。

四、质量控制与注意事项

• 标本污染：避免口腔正常菌群干扰咽拭子结果。
• 溶血现象误判：与其他β溶血菌（如某些葡萄球菌）鉴别需依赖生化或分子检测。
• 分子检测假阳性：注意引物特异性及交叉污染控制。

五、总结