猪用疫苗检测：核心检测项目解析

一、理化性质检测

1. • 目的：观察疫苗的色泽、澄清度及有无异物或沉淀。
   • 方法：目视或光学显微镜观察。
   • 标准：液体疫苗应澄清无杂质；冻干疫苗呈疏松团块，易溶解。
2. • 目的：确保疫苗的酸碱度适宜，避免对接种动物产生刺激。
   • 方法：使用pH计进行测定。
   • 标准：通常为6.8-7.8，具体依据疫苗类型调整。
3. • 目的：评估疫苗在不同储存条件下的有效期。
   • 方法：加速破坏试验（如高温、反复冻融）后检测活菌/病毒滴度或抗原活性。

二、安全性检测

1. • 目的：检测疫苗中是否存在非特异性毒性物质。
   • 方法：接种小鼠或豚鼠，观察7天内是否出现死亡或中毒症状。
   • 标准：试验动物应全部存活且无异常反应。
2. • 目的：评估疫苗中残留的异源蛋白（如牛血清白蛋白）引发的过敏风险。
   • 方法：ELISA法检测残留量，或豚鼠主动过敏试验。
3. • 目的：确保疫苗无细菌、真菌或支原体污染。
   • 方法：接种硫乙醇酸盐培养基（厌氧菌）或胰蛋白酶大豆琼脂（需氧菌），培养14天观察；支原体检测采用PCR或培养法。

三、效力检测（效价评估）

1. • 方法：
     • 血清学检测：通过ELISA、病毒中和试验（VNT）测量免疫后抗体水平。
     • 细胞免疫检测：如IFN-γ释放试验评估T细胞应答。
   • 标准：抗体滴度需达到保护阈值（如口蹄疫疫苗中和抗体≥1:64）。
2. • 目的：直接验证疫苗对强毒株攻击的保护效果。
   • 方法：免疫动物后接种活毒，观察发病率及死亡率。
   • 适用类型：活疫苗或灭活疫苗的关键效力验证。
3. • 方法：SDS-PAGE电泳、高效液相色谱（HPLC）或定量PCR（针对核酸疫苗）。

四、微生物学检测

1. • 重点：非洲猪瘟病毒（ASFV）、猪圆环病毒（PCV）等潜在污染物。
   • 方法：PCR、高通量测序（NGS）或细胞培养法。
2. • 目的：确认病原体已完全灭活，无复制能力。
   • 方法：接种敏感细胞连续传代3代，无病变则为合格。

五、其他专项检测

1. • 项目：粒径分布（如纳米佐剂）、重金属残留（如铝佐剂）。
2. • 目的：确认疫苗毒株与标称一致。
   • 方法：基因测序、单克隆抗体中和试验。
3. • 重点：抗生素（如生产过程中使用的庆大霉素）、细胞基质残留（如Vero细胞DNA）。

六、检测标准与法规依据

• 中国标准：《中华人民共和国兽药典》《兽用生物制品质量标准》。
• 国际参考：世界动物卫生组织（OIE）《Manual of Diagnostic Tests and Vaccines for Terrestrial Animals》。

七、挑战与趋势

1. 新技术应用：mRNA疫苗需增加脂质纳米颗粒包封率检测；类器官模型替代部分动物试验。
2. 标准化难题：不同毒株的攻毒试验缺乏统一评判标准。