伊红美兰琼脂培养基/曙红亚甲蓝琼脂培养基检测概述
伊红美兰琼脂培养基(Eosin Methylene Blue Agar,简称EMB培养基),又称曙红亚甲蓝琼脂培养基,是一种选择性鉴别培养基,广泛应用于微生物学检测领域,尤其是针对肠道致病菌的分离与鉴定。该培养基通过结合伊红Y(Eosin Y)和亚甲蓝(Methylene Blue)两种指示剂,能够有效抑制革兰氏阳性菌的生长,同时利用乳糖发酵特性区分革兰氏阴性菌中的不同种类,如大肠埃希氏菌(Escherichia coli)、沙门氏菌(Salmonella)和志贺氏菌(Shigella)等。其核心检测原理基于目标菌的代谢特性,通过菌落颜色和形态差异实现快速鉴别,是食品卫生、水质监测及临床微生物检验中的重要工具。
检测项目与核心功能
伊红美兰琼脂培养基的主要检测项目包括以下几方面:
1. 肠道致病菌的分离培养: 通过培养基的选择性成分(如胆盐)抑制非目标菌,优先促进肠道革兰氏阴性杆菌的生长,适用于粪便、食品或环境样本中致病菌的筛查。
2. 大肠菌群的定量分析: 结合平板计数法,可定量检测样本中大肠菌群的数量,常用于饮用水、食品加工环节的卫生学评价。
3. 菌落形态与代谢特性鉴别: 乳糖发酵菌(如大肠杆菌)在培养基中产酸,引发伊红与亚甲蓝形成复合物,菌落呈现紫黑色金属光泽;非乳糖发酵菌(如沙门氏菌)则形成无色或淡粉色透明菌落。这一特性显著提升检测效率。
检测操作流程
典型的伊红美兰琼脂检测流程包括以下步骤:
1. 样本处理: 液体样本可直接接种,固体样本需经均质化后梯度稀释。
2. 接种与培养: 采用倾注法或划线法接种,置于35-37℃恒温箱中培养18-24小时。
3. 结果观察: 记录菌落形态、颜色及是否产生金属光泽,结合革兰氏染色和生化试验进行确认。
结果判读标准
根据菌落特征进行初步鉴定:
• 大肠杆菌:紫黑色菌落,直径2-3mm,具典型金属光泽;
• 产气肠杆菌:棕褐色菌落,中心颜色较深;
• 沙门氏菌/志贺氏菌:无色或淡粉色透明菌落,边缘清晰。
注意事项与局限性
• 培养基需避光保存,防止指示剂降解;
• 过度延长培养时间可能导致假阳性结果;
• 对乳糖迟发酵菌(如部分变形杆菌)需结合其他生化试验验证;
• 检测需配合阴性/阳性对照以确保准确性。

