马病毒性动脉炎(马病毒性动脉炎病毒感染)概述
马病毒性动脉炎(Equine Viral Arteritis, EVA)是由马动脉炎病毒(EAV)引起的一种传染性疾病,主要影响马属动物(如马、驴、骡等)。该病以呼吸道症状、发热、流产(妊娠母马)及全身性血管炎为主要特征,具有高度传染性,对马匹健康及养殖业经济危害极大。EAV通过直接接触、精液传播或呼吸道分泌物传播,感染后可能导致隐性感染或急性发病,严重时可引发大规模疫情。因此,及时准确的检测对防控疫情、保障马匹健康及国际动物贸易安全至关重要。
检测项目
EVA的检测项目主要包括以下几个方面:
1. 病毒分离与鉴定:通过采集病料(如鼻拭子、血液、精液或流产胎儿组织)进行病毒培养,分离并鉴定EAV。
2. 血清学抗体检测:检测马匹血清中的EAV特异性抗体(IgG和IgM),用于判断既往感染或疫苗接种效果。
3. 核酸检测(RT-PCR):通过分子生物学技术检测病毒RNA,适用于早期诊断和携带者筛查。
4. 抗原检测:利用免疫荧光(IFA)或ELISA技术直接检测样本中的病毒抗原。
检测仪器
EVA检测中常用的仪器包括:
1. PCR仪:用于病毒RNA的扩增和检测。
2. 酶标仪(ELISA Reader):用于读取ELISA试验中的光密度值,判断抗体或抗原的存在。
3. 细胞培养设备:如CO₂培养箱、生物安全柜,用于病毒分离与扩增。
4. 荧光显微镜:用于观察免疫荧光标记的抗原抗体反应。
检测方法
1. 病毒分离法:将样本接种于敏感细胞系(如RK-13细胞),观察细胞病变效应(CPE),结合免疫学方法确认病毒。
2. RT-PCR技术:提取样本RNA后,通过逆转录-聚合酶链式反应扩增病毒特异性基因片段(如ORF7),结合电泳或实时荧光定量分析结果。
3. ELISA检测:采用包被EAV抗原的微孔板捕获血清中的抗体,通过酶标二抗显色定量分析。
4. 免疫荧光试验(IFA):将样本固定于载玻片,加入荧光标记抗体,通过荧光显微镜观察特异性荧光信号。
检测标准
EVA检测需遵循国际及国内标准以确保结果可靠性:
1. 世界动物卫生组织(OIE)标准:推荐病毒分离、血清中和试验(SNT)及RT-PCR为官方诊断方法。
2. 国家标准(GB/T):中国《马病毒性动脉炎诊断技术》(GB/T 22915-2008)规定了病毒分离、ELISA和RT-PCR的操作规范。
3. 行业规范:如实验室生物安全等级(BSL-2)、质控样本使用及结果判读阈值要求。
通过以上检测项目、仪器、方法及标准的综合应用,可实现对EAV感染的高效诊断与监测,为马群的健康管理和疫情控制提供科学依据。

