实验室拥有众多大型仪器及各类分析检测设备,研究所长期与各大企业、高校和科研院所保持合作伙伴关系,始终以科学研究为首任,以客户为中心,不断提高自身综合检测能力和水平,致力于成为全国科学材料研发领域服务平台。
细胞液体闪烁分析检测围绕细胞样本中的放射性标记物展开,采用液体闪烁计数技术定量分析放射性活度与代谢分布,以下按检测信息、项目、范围、仪器、方法、流程与样品要求逐项说明。
细胞液体闪烁分析是以闪烁液为介质、测量细胞或细胞组分中放射性核素衰变信号的分析技术,服务对象与用途如下:
- 检测对象:经放射性核素(如氚、碳-14等β核素)标记培养或标记处理后的细胞、细胞裂解物及培养上清。
- 典型送检场景:细胞增殖试验、药物代谢与摄取研究、受体结合实验、DNA与蛋白质合成速率测定等。
- 报告用途:用于科研课题数据分析、内部质量控制、项目结题材料以及合作方之间的数据交接。
- 样品形态:细胞沉淀、细胞裂解液、分离的亚细胞组分或含标记代谢物的培养液均可受理。
以下列出本检测常见的可测项目,每项对应一类指标或表征内容:
- 总放射性活度测定:测量样本单位体积或单位质量的每分钟衰变计数,表征标记物总量。
- 氚标记物掺入量分析:量化氚标记前体进入细胞大分子的比例,反映合成活性。
- 碳-14标记物摄取检测:测定细胞对碳-14标记底物的摄取量,表征转运与代谢能力。
- 细胞增殖活性分析:以标记核苷掺入水平评价细胞增殖速率。
- DNA合成速率测定:通过标记胸腺嘧啶类前体的掺入量推算DNA合成快慢。
- 蛋白质合成速率测定:以标记氨基酸掺入量表征翻译活性。
- 受体配体结合试验:测量与细胞受体结合的标记配体量,计算结合亲和参数。
- 代谢产物分布分析:分离细胞与培养液中的标记产物,给出放射性分布比例。
- 细胞摄取动力学分析:按时间梯度测量摄取量变化,拟合摄取速率参数。
- 药物细胞滞留量检测:量化标记药物在细胞内的滞留与外排情况。
- 淬灭校正与计数效率评估:校正样本淬灭影响,保证活度读数可比。
- 本底与对照测量:测定空白与本底计数,据此扣除非特异性信号。
本检测适用于多种经放射性标记的细胞类样本与相关制品,覆盖面较宽: 原代培养细胞、传代肿瘤细胞株、免疫细胞(淋巴细胞、巨噬细胞、树突状细胞)、干细胞及其诱导分化产物,均可作为标记掺入与摄取分析的对象。此类样本多用于基础研究与药物筛选。 微生物细胞(细菌、酵母、真菌菌丝体)、藻类与植物悬浮细胞、寄生虫与原生动物培养物,适合开展标记底物代谢与合成速率类测定。 细胞裂解物、细胞膜组分、细胞核与线粒体等亚细胞组分、含标记产物的培养上清、分离纯化后的标记蛋白与核酸样品,也在可测范围内。 此外,放射性标记药物与细胞共孵育体系、化妆品原料细胞毒性试验残留物、环境样品中标记示踪的细胞组分等,也可按相应制样流程受理。
实验室配备以下通用类型仪器设备,支撑从制样到计数的全流程:
- 液体闪烁计数器:核心设备,探测闪烁液中β粒子激发的荧光光子并输出计数。
- 液体闪烁测量瓶自动进样器:批量承接样品瓶,按序完成计数测量。
- 多标记液体闪烁分析仪:区分不同能量窗口的核素信号,用于双标记样品。
- 紫外-可见分光光度计:测定蛋白或核酸浓度,用于计数结果的归一化。
- 低速与高速冷冻离心机:分离细胞沉淀、亚细胞组分与上清。
- 超声波细胞破碎仪:裂解细胞,制备适合与闪烁液混溶的样品。
- 微量移液系统与电动移液器:完成微升级试剂与样品的定量转移。
- 恒温培养振荡器:开展标记前体的孵育与掺入反应。
- 固相分离装置:过滤收集沉淀型样品,如掺入大分子的标记前体。
- 样品浓缩与氮吹装置:浓缩稀浓度样本,提高计数信号。
方法选择取决于核素种类、样品基质与测试目的,常用方法如下:
- 液体闪烁计数法:将样品分散于闪烁液中,直接测量荧光计数,适用于β核素样本。
- 均相闪烁测量法:样品与闪烁液形成透明均相,适合裂解液与可溶性样品。
- 固相掺入测量法:沉淀收集掺入大分子的标记物于滤膜,洗涤后测量剩余放射性。
- 相分离测量法:利用水相与有机相分层,分别测量不同相中的放射性分布。
- 双标记道比法:按能量窗区分两种核素,适用于双标记同时测量。
- 外标准源淬灭校正法:以外标准源确定淬灭水平,校正计数效率。
- 样品道比法:依据样品自身谱形计算淬灭指数,用于效率校正。
- 分光光度法:配套测定蛋白或核酸浓度,将计数结果归一化为单位质量指标。
- 覆盖氚、碳-14等常见β核素的单标记与双标记测量,适配多类细胞样品形态。
- 制样经验成熟,沉淀、裂解液、上清与亚细胞组分均有对应处理流程。
- 配备淬灭校正体系,不同颜色与基质样品的活度数据可横向比较。
- 报告格式规范,可用于课题质控、数据交接与贸易合作方审阅。
- 由具备权威资质认证的实验室承接,测试记录与原始数据可追溯。
1. 沟通需求:确认核素种类、样品形态、测试目的与计数时长要求。
2. 方案与报价确认:出具测试方案与费用说明,双方确认后启动。
3. 寄样:按低温运输要求寄送细胞沉淀或裂解样品,附样品信息表。
4. 实验室检测:完成制样、闪烁液配制、上机计数与淬灭校正。
5. 数据审核出具报告:复核原始计数与计算过程,签发检测报告。
6. 报告解读与售后:解答报告疑问,必要时补充复测或方法说明。
样品状态直接决定计数质量,寄样前请对照以下要求:
- 细胞沉淀样品经磷酸盐缓冲液洗涤后离心收集,弃上清,低温保存并冷链寄送。
- 裂解液样品注明裂解液组成,避免含强淬灭组分的有机溶剂残留。
- 培养上清注明标记物名称与初始浓度,以便安排相分离或分布测量。
- 每份样品提供足量体积或细胞数,保证计数统计的可靠性。
- 注明核素种类与估计活度范围,实验室据此设定测量窗口与时长。
- 样品避免反复冻融,运输过程保持低温,收样后尽快安排测试。
NEW · 全新上线
VR实验室上线啦!
720°全景实景观览 · 足不出户走进实验室
立即体验
检测咨询 · 立即在线沟通